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Gibco胎牛血(xue)清(qing)(南(nan)美(mei))10270-106 科(ke)研實(shi)驗(yan)用胎牛血(xue)清(qing)本(ben)品(pin)采(cai)集(ji)產(chan)前(qian)胎牛,3次0.1μm過濾(lv),內(nei)毒素低(≤10Eμ/ml),其有(you)促細胞(bao)生長繁(fan)殖活性(xing)。細胞(bao)生長(快)曲線峰值 1.4 X 106細胞(bao)倍(bei)增時(shi)間(短) ≤17小時細胞(bao)克(ke)隆(long)率(lv)(高) ≥80%適合(he):細(xi)胞(bao)株(zhu)的(de)保(bao)藏及(ji)組織(zhi)器(qi)官(guan)培養(yang)
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Gibco胎牛血(xue)清(qing)(南(nan)美(mei))10270-106
產(chan)品(pin)貨(huo)號: 10270-106
產(chan)品(pin)規格(ge): 500ML
產(chan)品(pin)商(shang)標(biao): GIBCO
Gibco胎牛血(xue)清(qing)(南(nan)美(mei))10270-106

1、 如(ru)何儲(chu)存(cun)和解(jie)凍(dong)血(xue)清(qing)才不會使(shi)產(chan)品(pin)質(zhi)量(liang)受損?
將(jiang)血(xue)清(qing)從冷(leng)凍(dong)箱取出後(hou),先置(zhi)於(yu)2~8℃冰箱使(shi)之(zhi)融(rong)解,然(ran)後在室(shi)溫下使(shi)之(zhi)全融(rong)。但必須(xu)註(zhu)意的是,融(rong)解過程中必須(xu)規則(ze)地(di)搖(yao)晃均勻。
長時(shi)間(jian)儲(chu)存(cun)在2-8℃時,血(xue)清(qing)中的(de)各(ge)種蛋白和脂(zhi)蛋白(如(ru)冷(leng)凝集(ji)素(su)、纖維蛋白原、玻(bo)粘連(lian)蛋(dan)白等(deng))可(ke)能(neng)聚集(ji)而形成(cheng)沈(chen)澱(dian)或可(ke)見(jian)的混(hun)濁。因此(ci),推(tui)薦(jian)在-20℃以(yi)下儲(chu)存(cun)血(xue)清(qing),並(bing)避(bi)免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
我們(men)建(jian)議(yi)血(xue)清(qing)應(ying)保存(cun)在-2O℃。若存(cun)放於4℃時(shi),請(qing)勿超過壹(yi)個(ge)月。若(ruo)壹次無法用完(wan)壹(yi)瓶(ping),建(jian)議(yi)無(wu)菌(jun)分裝血(xue)清(qing)至(zhi)恰(qia)當(dang)的(de)滅(mie)菌(jun)容(rong)器(qi)內(nei),再(zai)放(fang)回(hui)冷(leng)凍(dong)。
2、血(xue)清(qing)中包含絮狀(zhuang)沈(chen)澱(dian),它們(men)是什(shen)麽,怎(zen)麽處(chu)理(li)?
沈澱(dian)包含纖維蛋白和脂(zhi)蛋白。這是正(zheng)常(chang)特性(xing),不會影(ying)響(xiang)產(chan)品(pin)性(xing)質。要除(chu)去(qu)沈澱(dian),離心血(xue)清(qing)(400g,1-2分鐘(zhong))或者簡單(dan)的(de)讓(rang)其(qi)沈(chen)澱(dian)在瓶子底部(bu),將(jiang)血(xue)清(qing)小心的轉(zhuan)移(yi)到(dao)另(ling)壹(yi)個無(wu)菌(jun)瓶(ping)裏(li)(壹(yi)般(ban)不建(jian)議(yi)采(cai)用過濾(lv)的(de)方(fang)法除(chu)去(qu)沈澱(dian),因為(wei)沈澱(dian)會堵塞(sai)濾(lv)膜而無法過濾(lv))。大(da)多(duo)情況輕(qing)輕(qing)搖(yao)動沈澱(dian)並(bing)加熱(re)至(zhi)37℃就(jiu)會(hui)再(zai)溶(rong)解。所(suo)以(yi),使(shi)用產(chan)品(pin)時(shi)要(yao)搖(yao)動並(bing)加熱(re)血(xue)清(qing)至(zhi)37℃,沈(chen)澱(dian)會自(zi)然消(xiao)失(shi)。
3、實(shi)驗(yan)室(shi)如(ru)何選擇(ze)適合(he)的(de)血(xue)清(qing)?
國內(nei)*認(ren)為(wei)HYCLONE的血(xue)清(qing)是的(de),但是根(gen)據(ju)我在北(bei)美的(de)經歷(li),國外(wai)壹(yi)般(ban)認為(wei)GIBCO比HYCLONE好(hao),所(suo)以(yi)並(bing)不(bu)是價格(ge)決(jue)定質量(liang),但是總(zong)的(de)來(lai)說這兩種價格(ge)普遍(bian)偏(pian)貴,壹(yi)般(ban)不是太(tai)嬌氣(qi)的(de)細(xi)胞(bao),國產(chan)的就(jiu)夠(gou)用了。此外(wai),由(you)於國內(nei)HYCLONE,GIBCO並(bing)沒有生產(chan)線,我(wo)們(men)只(zhi)能(neng)從代(dai)理商那裏買(mai),而代(dai)理商又(you)魚龍混(hun)雜,所以(yi)買(mai)到(dao)假(jia)貨(huo)的(de)可能(neng)性(xing)也很(hen)大(da)。所(suo)以(yi),我壹般(ban)會從(cong)直銷員那裏買(mai)血(xue)清(qing),有的(de)國外(wai)生物(wu)公(gong)司由於剛(gang)剛(gang)進(jin)入(ru)中國,度不高,但是其(qi)實(shi)在國外(wai)已(yi)經做得(de)很(hen)不(bu)錯(cuo)了,如(ru)Wisent等(deng),他們(men)在國內(nei)有(you)辦(ban)事處(chu),我(wo)會(hui)從那裏拿,血(xue)清(qing)的品(pin)質(zhi)和HYCLONE不(bu)相(xiang)上下,但價格(ge)相對優惠很(hen)多(duo)。
4、 如(ru)何避(bi)免血(xue)清(qing)中產(chan)生沈澱(dian)?
按如(ru)下操作(zuo)可避(bi)免沈澱(dian)的產(chan)生:
(1)解凍(dong)血(xue)清(qing)時,請(qing)隨(sui)時將(jiang)之搖(yao)晃均勻,使(shi)溫度及(ji)成分均壹,減(jian)少(shao)沈(chen)澱(dian)的發(fa)生。
(2) 血(xue)清(qing)分裝凍(dong)存(cun)時,須(xu)規則(ze)搖(yao)晃均勻(小心勿造成(cheng)氣泡(pao)),使(shi)溫度與(yu)成(cheng)分均壹。
(3) 勿直接(jie)由-20℃直接(jie)至(zhi)37℃解(jie)凍(dong),因(yin)溫度改變太(tai)大,容(rong)易造(zao)成蛋白質凝結(jie)而發生沈澱(dian)。
(4) 勿將(jiang)血(xue)清(qing)置於(yu)37℃太(tai)久,否則(ze)血(xue)清(qing)會變(bian)得(de)渾(hun)濁,同時(shi)血(xue)清(qing)中許多(duo)較不(bu)穩定的成(cheng)份(fen)也會因(yin)此(ci)受到破壞(huai),從而影響(xiang)血(xue)清(qing)的品(pin)質(zhi)。
(5) 血(xue)清(qing)的熱(re)滅(mie)活非常容(rong)易(yi)造(zao)成沈(chen)澱(dian)物(wu)的(de)增多(duo),若非(fei)必要(yao),可以(yi)無須(xu)做此步(bu)驟(zhou)。
(6) 若(ruo)必須(xu)做血(xue)清(qing)的熱(re)滅(mie)活,請遵守(shou)56℃,30分鐘(zhong)的(de)原(yuan)則,並(bing)且隨(sui)時搖(yao)晃均勻。溫度過高,時間過久(jiu)或搖(yao)晃不均勻,都(dou)會造(zao)成沈(chen)澱(dian)物(wu)的(de)增多(duo)。
5、 培養(yang)基(ji)中(zhong)添加了血(xue)清(qing)和抗生素後(hou),可長期(qi)保(bao)存(cun)嗎(ma)?
壹旦您在新(xin)鮮(xian)培養(yang)基(ji)中(zhong)添加了血(xue)清(qing)和抗生素時(shi),您應(ying)該在兩到三(san)周(zhou)內(nei)使(shi)用它。因為(wei)壹些抗生素和血(xue)清(qing)中的(de)基(ji)本(ben)成分在解凍(dong)後(hou)就(jiu)開始(shi)降(jiang)解。
6、 為(wei)什麽要(yao)熱(re)滅(mie)活血(xue)清(qing)?
加熱(re)可(ke)以(yi)滅活補體系(xi)統。激活(huo)的補體參(can)與(yu)溶(rong)解細(xi)胞(bao)事(shi)件,刺(ci)激平(ping)滑肌(ji)收(shou)縮(suo),細胞(bao)和血(xue)小板釋(shi)放組胺,激活(huo)淋(lin)巴(ba)細胞(bao)和巨噬(shi)細(xi)胞(bao)。在免疫學(xue)研究,培養(yang)ES細胞(bao)、平(ping)滑肌(ji)細胞(bao)時(shi),推(tui)薦(jian)使(shi)用熱(re)滅(mie)活血(xue)清(qing)。
7、 有必(bi)要(yao)做熱(re)滅(mie)活嗎(ma)?
實(shi)驗(yan)顯(xian)示(shi),經(jing)過正(zheng)確(que)處理(li)的熱(re)滅(mie)活血(xue)清(qing),對大多(duo)數的(de)細胞(bao)而言是不(bu)需(xu)要的(de)。經(jing)此處(chu)理過的(de)血(xue)清(qing)對細胞(bao)的(de)生長只(zhi)有(you)微(wei)小的促進(jin),或*沒有任(ren)何作(zuo)用,甚至(zhi)通(tong)常(chang)因(yin)為(wei)高溫處理(li)影(ying)響(xiang)了血(xue)清(qing)的質(zhi)量(liang),而造成(cheng)細(xi)胞(bao)生長速(su)率(lv)的(de)降(jiang)低。而經過熱(re)處(chu)理的血(xue)清(qing),沈澱(dian)物(wu)的(de)形(xing)成會顯(xian)著(zhu)的(de)增多(duo),這些沈(chen)澱(dian)物(wu)在倒置顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察,像是“小黑點”,常常會讓(rang)研究者誤以(yi)為(wei)是血(xue)清(qing)遭(zao)受汙染(ran),而把血(xue)清(qing)放在37℃環(huan)境(jing)中,又(you)會使(shi)此(ci)沈澱(dian)物(wu)更(geng)增多(duo),使(shi)研究者誤認(ren)為(wei)是微(wei)生物(wu)的(de)分裂(lie)擴(kuo)增。
若(ruo)非必須(xu),可以(yi)不需要做熱(re)處(chu)理這壹步(bu)。不(bu)但節省(sheng)時(shi)間,更(geng)確保血(xue)清(qing)的質(zhi)量(liang)!
8、細胞(bao)培養(yang)中出現黑(hei)點是汙(wu)染(ran)嗎(ma)?如(ru)何處(chu)理?
壹(yi)旦您在細胞(bao)培養(yang)的過程中發現(xian)有黑(hei)點生成,首(shou)先,要(yao)肉(rou)眼觀察培養(yang)基(ji)是否(fou)混(hun)濁,然後(hou),在鏡(jing)下觀察培養(yang)細胞(bao)生長的(de)狀(zhuang)態,黑(hei)點是否(fou)遊(you)動。如(ru)果細胞(bao)被(bei)汙(wu)染(ran),微(wei)生物(wu)則(ze)會(hui)大量繁(fan)殖,培養(yang)基(ji)就(jiu)會(hui)迅(xun)速(su)變(bian)黃(huang)、變(bian)混(hun)濁。汙染(ran)包括(kuo)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)、支(zhi)原(yuan)體汙染(ran)等(deng)。
如(ru)果在鏡(jing)下觀察細胞(bao),生長狀(zhuang)態良(liang)好(hao),與(yu)黑(hei)點出現前(qian)相(xiang)比(bi),沒有任(ren)何變(bian)化,那麽,黑(hei)點的出現可(ke)能(neng)與(yu)以(yi)下幾種(zhong)情況有關(guan):
(1)細胞(bao)生長過老(lao),破(po)碎(sui)的細(xi)胞(bao)殘(can)骸(hai);
(2)血(xue)清(qing)質量(liang)不(bu)好(hao),反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)的結(jie)果;
(3)配制(zhi)培養(yang)基(ji)的(de)pH值偏(pian)高,不宜細胞(bao)生長;
(4)配(pei)制(zhi)培養(yang)基(ji)的(de)水(shui)質(zhi)、容器不合(he)格(ge)。可應(ying)用離心、過濾(lv)的(de)方(fang)法去(qu)除(chu)這些黑(hei)點;
(5)培養(yang)原代(dai)細胞(bao)中(zhong)出(chu)現(xian)小黑點,可能(neng)是原(yuan)代(dai)組織(zhi)中(zhong)的(de)雜質,多(duo)次傳代(dai)可以(yi)消(xiao)除(chu)。
9、 細胞(bao)培養(yang)中如(ru)何防(fang)止(zhi)黑(hei)點生成?
(1) 盡(jin)可能(neng)地(di)減(jian)少(shao)血(xue)清(qing)凍(dong)融(rong)次數(shu)。
(2) 培養(yang)基(ji)無(wu)需(xu)37℃水(shui)浴(yu)。
(3) 培養(yang)基(ji)保(bao)持(chi)*PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yan)格(ge)控(kong)制配制培養(yang)基(ji)的(de)水(shui)質(zhi),容器定期刷(shua)洗(xi)。
(5) 掌(zhang)握(wo)細胞(bao)傳代(dai)的*時機,細胞(bao)切(qie)勿生長過老(lao)。
10、小牛血(xue)清(qing)和胎牛血(xue)清(qing)有何區別與(yu)註(zhu)意事項(xiang)?
來(lai)源不同:胎牛血(xue)清(qing)(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠(tu)宰(zai)懷孕母牛的(de)時(shi)候(hou),通(tong)過心(xin)臟穿刺(ci)采(cai)血(xue)獲(huo)取(qu)的(de)胎牛的血(xue)清(qing),新(xin)生牛(小牛)血(xue)清(qing)(Calf serum, CS)采自(zi)出生10至(zhi)14 天(tian)的小牛。
組份與(yu)比(bi)例(li)不同(tong):兩(liang)者所含的促(cu)細(xi)胞(bao)生長因(yin)子(zi)、促貼(tie)附因子、激素(su)及(ji)其他活(huo)性(xing)物(wu)質(zhi)等(deng)組份與(yu)比(bi)例(li)不同(tong),用途與(yu)用法不同(tong):某(mou)些細(xi)胞(bao)必(bi)需(xu)胎牛血(xue)清(qing)才能(neng)生長,而有些細(xi)胞(bao)只(zhi)需(xu)小牛血(xue)清(qing)即可(ke),使(shi)用濃度不同,壹(yi)般(ban)在5%-10%,有特殊(shu)要(yao)求(qiu)的(de)濃(nong)度在20%。
血(xue)清(qing)保存(cun)和使(shi)用須(xu)註(zhu)意:血(xue)清(qing)應(ying)保存(cun)在-5℃至(zhi)-20℃,若(ruo)存(cun)放在4℃不可超過壹(yi)個(ge)月。解(jie)凍(dong)血(xue)清(qing)時 ,應(ying)先將(jiang)血(xue)清(qing)至(zhi)於(yu)2-8℃冰(bing)箱,並(bing)經(jing)常搖(yao)勻(yun)使(shi)之(zhi)溶(rong)解,然(ran)後至(zhi)室(shi)溫放置(zhi)使(shi)之(zhi)升(sheng)溫,不可(ke)將(jiang)冷(leng)凍(dong)的(de)血(xue)清(qing)直接(jie)放入(ru)37℃水(shui)浴(yu)或者溫箱中,如(ru)放(fang)在37℃解凍(dong),顏色加深,粘稠(chou)度也會增加,血(xue)清(qing)在解凍(dong)和熱(re)滅(mie)活後,應(ying)按用量分裝並(bing)於(yu)-20℃保存(cun),避免反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)。
胎牛血(xue)清(qing)
采用健(jian)康(kang)母牛懷孕的八(ba)月(yue)齡(ling)胎牛血(xue)液(ye)為(wei)原料(liao),經無(wu)菌(jun)采(cai)集(ji)、分離、微(wei)孔過濾(lv)後(hou)而成。本(ben)產(chan)品(pin)無(wu)支(zhi)原(yuan)體、無牛病毒、無噬毒體、內(nei)毒素含量低於1EU/ml,適用於細胞(bao)、組織(zhi)器(qi)官(guan)培養(yang)、細胞(bao)株(zhu)保(bao)藏、單(dan)抗研制(zhi),是醫院、科(ke)研院校(xiao)、動物(wu)疫(yi)苗、生物(wu)制(zhi)藥廠家(jia)重要培養(yang)基(ji)之(zhi)壹(yi)。
保(bao)存(cun)血(xue)清(qing)的方(fang)法是什(shen)麽??上海信(xin)帆(fan)生物(wu)建(jian)議(yi)血(xue)清(qing)應(ying)保存(cun)在-5℃至(zhi)-2O℃。但是,若(ruo)存(cun)放於?4℃時(shi),請(qing)勿超過壹(yi)個(ge)月。若(ruo)您壹次無法用完(wan)壹(yi)瓶(ping),建(jian)議(yi)您無菌(jun)分裝血(xue)清(qing)至(zhi)恰(qia)當(dang)的(de)滅(mie)菌(jun)容(rong)器(qi)內(nei),再(zai)放(fang)回(hui)冷(leng)凍(dong)。反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong)會對血(xue)清(qing)的品(pin)質(zhi)造(zao)成(cheng)不(bu)良影響(xiang)。
胎牛血(xue)清(qing)
Fetal Bovine Serum產(chan)於澳大利亞(ya),血(xue)源(yuan)以(yi)封(feng)閉(bi)的(de)心(xin)臟穿刺(ci)方(fang)式采(cai)自(zi)8月齡胎牛,產(chan)品(pin)經(jing)3次(ci)100nm過濾(lv),在凈化車(che)間過濾(lv)包裝。經嚴(yan)格(ge)檢測確保(bao)無支(zhi)原(yuan)體,細菌(jun)病毒檢測依據(ju)美國藥典(dian)(USP)和美(mei)國聯(lian)邦(bang)法規第(di)九篇(pian)(9CFR),符合(he)檢測標(biao)準(zhun)。
總(zong)蛋白:3.5~5.0%,
內(nei)毒素含量≤1.0EU/ml
血(xue)紅(hong)蛋白含量≤0.02%
pH:6.7~8.0
滲(shen)透壓(ya)(mom/Kg H2O):240~340
無(wu)菌(jun)檢驗(yan):陰(yin)性(xing)
支(zhi)原(yuan)體—展示:陰(yin)性(xing)
病毒檢驗(yan):陰(yin)性(xing)


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