按(an)試劑盒說明書的(de)要求準備(bei)實(shi)驗中(zhong)需(xu)用(yong)的試劑。ELISA試劑(ji)盒(he)中(zhong)用(yong)的蒸餾(liu) 水或去離子(zi)水,包括用(yong)於(yu)洗滌(di)的,應(ying)為新鮮(xian)的(de)和高(gao)質量(liang)的(de)。自配的(de)緩沖液應(ying)用(yong)pH計(ji)測量(liang)較正。從冰(bing)箱中(zhong)取出的試(shi)驗(yan)用(yong)試劑應待(dai)溫度與(yu)室(shi)溫平衡(heng)後使(shi)用(yong)。試劑盒中本(ben)次(ci)試(shi)驗(yan)不(bu)需(xu)用(yong)的部分應及(ji)時(shi)放(fang)回(hui)冰(bing)箱保(bao)存。
ELISA試劑(ji)盒的(de)配制(zhi):對(dui)於(yu)每(mei)種(zhong)細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)應(ying)仔(zai)細閱讀說明書,註(zhu)意每(mei)批(pi)的(de)細節(jie)。在使(shi)用(yong)細胞(bao)因(yin)子(zi)前(qian),瞬(shun)時離心(xin)試(shi)劑瓶,盡可能(neng)多地收(shou)回(hui)其(qi)中的細胞(bao)因(yin)子(zi)。根據(ju)每(mei)批(pi)說明書中(zhong)的細(xi)節(jie),將(jiang)凍(dong)幹的(de)細胞(bao)因(yin)子(zi)復溶。 壹般待(dai)測抗原(yuan)標準(zhun)曲(qu)線的(de)線性(xing)範(fan)圍的可通(tong)過(guo)將(jiang)標(biao)準(zhun)品(pin)做8次(ci)2倍(bei)系(xi)列(lie)稀(xi)釋從(cong)2000pg/ml到(dao)15pg/ml。可利(li)用(yong)標準的試劑(ji)盒(he)操(cao)作(zuo)流程(cheng)、放(fang)大(da)試(shi)劑盒、第(di)三類試劑、或(huo)改(gai)變(bian)酶底(di)物(wu)系(xi)統可在(zai)壹定範(fan)圍內提高(gao)靈敏(min)度。為了優化(hua)靈敏(min)度,建議孵育(yu)標準(zhun)品(pin)和標本(ben)。若使(shi)用(yong)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶作為顯色(se)系(xi)統,應嚴禁(jin)在(zai)洗液和稀釋液(ye)中加(jia)疊(die)氮鈉(na),疊(die)氮鈉(na)可抑(yi)制(zhi)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)試劑盒酶的(de)活(huo)性。
ELISA試(shi)劑(ji)盒的(de)操(cao)作(zuo)因(yin)固(gu)相載(zai)體(ti)的(de)形成(cheng)不(bu)同而有(you)所差(cha)異(yi),國(guo)內(nei)醫學(xue)檢驗壹般均(jun)用(yong)板式點。本(ben)文(wen)將(jiang)敘(xu)述板(ban)式ELISA各個(ge)操(cao)作(zuo)步驟(zhou)的註(zhu)意(yi)要(yao)點,ELISA檢測試(shi)劑盒(he)珠(zhu)式(shi)、管(guan)式及(ji)磁性球ELSIA,國(guo)外(wai)試(shi)劑均(jun)與(yu)特殊儀器(qi)配(pei)合應用(yong)。
可用(yong)作 ELISA試劑盒 測(ce)定(ding)的(de)標本(ben)十分廣(guang)泛(fan),體(ti)液(如(ru)血(xue)清 )、分泌(mi)物(唾(tuo)液)和排泄物(wu)(如(ru)尿(niao)液、糞(fen)便(bian))等均(jun)可作(zuo)標(biao)本(ben)以測(ce)定(ding)其(qi)中某(mou)種抗(kang)體 或(huo)抗原成(cheng)份(fen)。試劑(ji)盒(he)有(you)些(xie)標(biao)本(ben)可直接(jie)進行測定(如(ru)血(xue)清 、尿(niao)液),有(you)些(xie)則(ze)需(xu)經(jing)預(yu)處(chu)理(li)(如(ru)糞便(bian)和某(mou)些(xie)分泌(mi)物)。這些(xie)標(biao)本(ben)收(shou)集(ji)的時(shi)間(jian)、方法(fa)和保(bao)存都有壹定的(de)要求。