大鼠(shu)Elisa試(shi)劑(ji)盒是(shi)通(tong)過酶聯免(mian)疫(yi)吸(xi)附(fu)反應進行實驗來檢(jian)測(ce)特定物質的試(shi)劑(ji)盒，試(shi)劑(ji)盒中(zhong)會有不(bu)同(tong)濃度(du)的標準樣品(pin)，在酶標條(tiao)中通(tong)過固(gu)相的抗原或(huo)抗體(ti)，酶標記(ji)的抗原或(huo)抗體(ti)，酶作用的底物反應可(ke)形(xing)成標準曲線，從而進行試(shi)驗(yan)樣品(pin)的測定。
大鼠(shu)Elisa試(shi)劑(ji)盒的樣品(pin)收(shou)集、處(chu)理(li)及保存方(fang)法：
1.血清：使(shi)用不(bu)含(han)熱原和(he)內(nei)毒素的試(shi)管(guan)，操作過程(cheng)中(zhong)避免(mian)任(ren)何細(xi)胞刺(ci)激(ji)，收集血液後，3000轉離(li)心10分(fen)鐘(zhong)將血(xue)清和紅細(xi)胞迅(xun)速小(xiao)心地分離(li)。
2.血(xue)漿：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽或(huo)肝(gan)素抗凝。3000轉離(li)心30分(fen)鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
3.細(xi)胞上(shang)清(qing)液(ye)：3000轉離(li)心10分(fen)鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)和(he)聚合(he)物。
4.組(zu)織(zhi)勻(yun)漿：將(jiang)組織(zhi)加入適量(liang)生(sheng)理鹽水搗碎(sui)。3000轉離(li)心10分(fen)鐘(zhong)取(qu)上(shang)清(qing)。
5.保存：如(ru)果(guo)樣(yang)本收集(ji)後不(bu)及時檢(jian)測(ce)，請(qing)按壹(yi)次用量(liang)分(fen)裝，凍(dong)存於(yu)-20℃，避免(mian)反復(fu)凍(dong)融(rong)，在室溫下(xia)解凍(dong)並確保樣(yang)品(pin)均勻(yun)地充(chong)分(fen)解凍(dong)。
大鼠(shu)Elisa試(shi)劑(ji)盒操(cao)作步驟：
1.通(tong)過計(ji)算並確定壹(yi)次性實(shi)驗(yan)所需的板條(tiao)數(shu)，取(qu)出所(suo)需(xu)板條(tiao)放置(zhi)在框架內(nei)，暫(zan)時用不(bu)到板(ban)條(tiao)請放回鋁箔(bo)袋密(mi)封，保存於(yu)4℃。
2.建議(yi)設置(zhi)本底較(jiao)正(zheng)孔，即(ji)空(kong)白(bai)孔，設置(zhi)方(fang)法為該(gai)孔只(zhi)加TMB顯(xian)色液(ye)和(he)中(zhong)止(zhi)液(ye)。每次實驗(yan)均(jun)需做(zuo)標準品對(dui)照(zhao)並畫出標準曲線。
3.分(fen)別(bie)將標本或不(bu)同(tong)濃度(du)標準品（100u1/孔）加(jia)入相(xiang)應孔中(zhong)，用封板膠紙封住(zhu)反應孔，室(shi)溫孵(fu)育(yu)120分鐘(zhong)。對(dui)於(yu)血(xue)清或血漿標本，請加(jia)入50u1樣(yang)本分析(xi)緩(huan)沖(chong)液後(hou)加50u1標本，如稀(xi)釋量(liang)大，請(qing)將(jiang)樣(yang)本與樣本分析(xi)緩(huan)沖(chong)液等(deng)量(liang)加(jia)入，不(bu)足部分用標準品稀(xi)釋液(ye)補(bu)充(chong)至100ul。
4.洗(xi)板(ban)5次，且置(zhi)厚吸(xi)水紙上(shang)拍幹(gan)。
5.加入生(sheng)物素化(hua)抗體(ti)工作液（100u1/孔）。用封板膠紙封住(zhu)反應孔，室(shi)溫孵(fu)育(yu)60分鐘(zhong)。
6.洗(xi)板(ban)5次，且置(zhi)厚吸(xi)水紙上(shang)拍幹(gan)。
7.加入酶結(jie)合物工作液（100u1/孔）。用封板膠紙封住(zhu)反應孔，避光(guang)室(shi)溫孵(fu)育(yu)20分鐘(zhong)。
8.洗(xi)板(ban)5次，且置(zhi)厚吸(xi)水紙上(shang)拍幹(gan)。
9.加入顯(xian)色(se)劑TMB100u1/孔，避光(guang)室(shi)溫孵(fu)育(yu)20分鐘(zhong)。
10.加入終(zhong)止(zhi)液(ye)50u1/孔，混(hun)勻(yun)後即(ji)刻(ke)測(ce)量(liang)0D450值(zhi)。
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更新時間(jian)：2022-09-26 
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