人谷(gu)胱(guang)甘肽(tai)合成酶ELISA試劑(ji)盒分析測(ce)定

人谷(gu)胱(guang)甘肽(tai)合成酶ELISA試劑(ji)盒分析測(ce)定

樣(yang)本處理(li)及(ji)要求(qiu)

1.  血清(qing)：將收集(ji)於血清(qing)分離管(guan)的全(quan)血標(biao)本在室(shi)溫(wen)放置(zhi)2小(xiao)時或4℃過夜(ye)，然後(hou)1000×g離心20 分鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)，或(huo)將上清(qing)置(zhi)於-20℃或-80℃保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免反(fan)復凍融。
2.  血漿：用(yong)EDTA或肝素(su)作為(wei)抗(kang)凝劑(ji)采集標(biao)本，並將(jiang)標(biao)本在采集後(hou)的30分鐘(zhong)內於2-8℃ 1000×g離心15分鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)，或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20℃或-80℃保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免反(fan)復凍融。
3.  組織(zhi)勻漿：用(yong)預(yu)冷(leng)的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗(xi)組織(zhi)，去(qu)除(chu)殘留(liu)血(xue)液（勻漿中(zhong)裂(lie)解的紅細胞會影響測(ce)量結果），稱(cheng)重後(hou)將(jiang)組織(zhi)剪(jian)碎(sui)。將(jiang)剪(jian)碎(sui)的組織(zhi)與(yu)對(dui)應(ying)體(ti)積(ji)的PBS（壹般(ban)按1:9的重量體(ti)積(ji)比，比如1g的組織(zhi)樣(yang)品(pin)對應(ying)9mL的PBS，具體(ti)體(ti)積(ji)可(ke)根(gen)據實(shi)驗需要(yao)適當調(tiao)整，並(bing)做好記(ji)錄(lu)。推薦(jian)在PBS中加入(ru)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑(ji)）加入(ru)玻(bo)璃(li)勻漿器(qi)中(zhong)，於冰上(shang)充(chong)分研磨。為(wei)了(le)進壹步(bu)裂(lie)解(jie)組織(zhi)細胞，可(ke)以(yi)對勻漿液進行(xing)超(chao)聲破(po)碎(sui)，或(huo)反(fan)復凍(dong)融。*後(hou)將(jiang)勻漿液於5000×g離心5~10分鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)檢(jian)測(ce)。

4.  細胞培養物(wu)上清(qing)或其它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本：請1000×g離心20分鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)，或將(jiang)上清(qing)置(zhi)於-20℃或-80℃保存(cun)，但(dan)應(ying)避(bi)免反(fan)復凍融。

需要而未提(ti)供(gong)的試(shi)劑(ji)和(he)器(qi)材(cai)

1. 酶標(biao)儀（450nm）

2. 高精度(du)加樣(yang)器(qi)及(ji)槍頭(tou)：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫(wen)箱

4. 蒸餾(liu)水(shui)或去離子(zi)水(shui)

實(shi)驗結果計(ji)算(suan)

以(yi)所(suo)測(ce)標(biao)準品的OD值(zhi)為(wei)橫(heng)坐標(biao)，標(biao)準品的濃度(du)值(zhi)為(wei)縱(zong)坐標(biao)，在坐標(biao)紙上或用(yong)相關(guan)軟(ruan)件(jian)繪制標(biao)準曲(qu)線，並得到(dao)直(zhi)線回(hui)歸(gui)方程，將樣(yang)品(pin)的OD值(zhi)代入方程，計(ji)算(suan)出樣(yang)品(pin)的濃度(du)。

1. 試劑(ji)盒從冷(leng)藏環境(jing)中取出應(ying)在室(shi)溫(wen)平衡15-30 分鐘(zhong)後(hou)方可(ke)使(shi)用(yong)，酶標(biao)包被(bei)板開封後(hou)如未用(yong)完(wan)，板(ban)條應(ying)裝(zhuang)入(ru)密(mi)封袋中保存(cun)。

2. 濃洗(xi)滌(di)液可(ke)能會有(you)結(jie)晶(jing)析出，稀釋(shi)時可(ke)在水(shui)浴中加溫(wen)助溶，洗(xi)滌(di)時不(bu)影響結(jie)果。

3. 各步(bu)加樣(yang)均(jun)應(ying)使(shi)用(yong)加樣(yang)器(qi)，並經常(chang)校對其準確(que)性(xing)，以避(bi)免試(shi)驗誤(wu)差。壹次加樣(yang)時(shi)間控制(zhi)在5 分鐘(zhong)內，如標(biao)本數量多(duo)，推(tui)薦(jian)使(shi)用(yong)排槍加樣(yang)。

4. 請(qing)每次測(ce)定的同(tong)時(shi)做標(biao)準曲(qu)線，建(jian)議(yi)做復孔。如標(biao)本中待(dai)測(ce)物(wu)質含(han)量過高（樣(yang)本OD 值(zhi)大(da)於標(biao)準品孔di壹孔的OD 值(zhi)），請(qing)先(xian)用(yong)樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液稀釋(shi)壹定倍數（n 倍）後(hou)再(zai)測(ce)定，計(ji)算(suan)時(shi)請(qing)z後(hou)乘(cheng)以總(zong)稀釋(shi)倍數（×n×5）。

5. 封板(ban)膜(mo)只(zhi)限壹次性(xing)使(shi)用(yong)，以避(bi)免交叉汙染。

6. 底(di)物(wu)請避(bi)光保(bao)存(cun)。

7. 嚴格按照說(shuo)明(ming)書的操(cao)作(zuo)進行(xing)，試(shi)驗(yan)結(jie)果判定必(bi)須以酶(mei)標(biao)儀讀(du)數為(wei)準.

8. 所(suo)有(you)樣(yang)品(pin)，洗(xi)滌(di)液和各種廢棄物(wu)都應(ying)按(an)傳(chuan)染物(wu)處理(li)。

9. 本試劑(ji)不(bu)同(tong)批(pi)號(hao)組分(fen)不(bu)得混用(yong)。

10. 試劑(ji)盒2-8℃冷(leng)藏，保質期(qi)6個(ge)月(yue)