豚(tun)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)的(de)組(zu)成(cheng)與保存

更(geng)新時間(jian):2025-08-12

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在(zai)生物醫學(xue)研(yan)究和(he)疾(ji)病(bing)診(zhen)斷(duan)領(ling)域,酶聯(lian)免疫吸附測定(ding)(ELISA)技(ji)術(shu)因其高靈(ling)敏度、高特異(yi)性和(he)操作(zuo)簡便性而被(bei)廣(guang)泛應(ying)用。豚鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)作為(wei)壹(yi)種(zhong)專(zhuan)門用於檢測豚(tun)鼠(shu)體內(nei)特定生物分子的(de)工(gong)具(ju),已成(cheng)為(wei)研(yan)究豚(tun)鼠(shu)模(mo)型(xing)中生理(li)和病(bing)理(li)過程(cheng)的(de)重要手段(duan)。
ELISA技(ji)術(shu)原理(li)
ELISA技術(shu)的(de)核心(xin)在(zai)於利(li)用抗原與抗體之間(jian)的(de)特異(yi)性結(jie)合反應(ying)。豚鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)通常(chang)采用“夾(jia)心(xin)法”或“競(jing)爭(zheng)法”進行(xing)檢測。在(zai)夾(jia)心(xin)法中,特異(yi)性的(de)捕(bu)獲(huo)抗體預先(xian)包(bao)被(bei)在(zai)微(wei)孔(kong)板(ban)上,加入含有(you)目標分子的(de)樣品(pin)後(hou),目標分子會被(bei)捕(bu)獲(huo)抗體結(jie)合。隨(sui)後(hou),加入與目標分子另壹(yi)端結(jie)合的(de)檢測抗體,該檢測抗體通常(chang)與酶(如辣根過氧化物酶HRP)偶聯(lian)。最後(hou),加入酶的(de)底物,發(fa)生顯(xian)色(se)反應(ying),其顏色(se)深(shen)淺(qian)與目標分子的(de)濃度(du)成(cheng)正(zheng)比。
豚(tun)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)的(de)技術(shu)特點
1.高靈(ling)敏度:能(neng)夠檢測到(dao)極(ji)低濃度(du)的(de)目標分子,部分試劑(ji)盒(he)的(de)靈(ling)敏度可達(da)pg/ml級(ji)別(bie)。
2.高特異(yi)性:通(tong)過特異(yi)性抗體識別(bie)目標分子,確保檢測結(jie)果的(de)準(zhun)確(que)性。
3.操作(zuo)簡便:試(shi)劑盒(he)提供(gong)了(le)完(wan)整(zheng)的(de)操作(zuo)流(liu)程(cheng)和(he)所需試(shi)劑(ji),用戶只(zhi)需(xu)按(an)照(zhao)說明書(shu)操作(zuo)即可(ke)。
4.結(jie)果準(zhun)確(que):標(biao)準(zhun)化的(de)試劑(ji)和(he)流(liu)程(cheng)減(jian)少(shao)了(le)人為(wei)誤(wu)差(cha),提高了(le)結(jie)果的(de)可靠(kao)性。
5.應(ying)用廣(guang)泛:適用(yong)於多(duo)種(zhong)生物樣本,如(ru)血清、血漿、組(zu)織勻(yun)漿(jiang)等(deng)。
豚鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)的(de)應(ying)用領域
1.疾(ji)病(bing)診(zhen)斷(duan):用(yong)於檢測豚(tun)鼠(shu)中的(de)疾(ji)病(bing)標(biao)誌(zhi)物,如炎癥因子、腫(zhong)瘤標(biao)誌(zhi)物等(deng)。
2.免疫學(xue)研(yan)究:用(yong)於研(yan)究豚(tun)鼠(shu)的(de)免疫反應(ying),檢測免(mian)疫球(qiu)蛋(dan)白、細(xi)胞(bao)因子等(deng)。
3.藥物開發(fa):用(yong)於藥(yao)物療效(xiao)和安(an)全(quan)性評價,監(jian)測藥(yao)物對豚(tun)鼠(shu)生物分子的(de)影響。
4.疫苗(miao)評價:用(yong)於疫苗(miao)的(de)免疫原性評價,檢測疫苗(miao)誘(you)導的(de)抗體水(shui)平(ping)。
豚(tun)鼠(shu)ELISA試劑(ji)盒(he)通常(chang)包含以(yi)下組(zu)分:預包(bao)被(bei)抗體的(de)微(wei)孔(kong)板(ban)、標準(zhun)品(pin)、檢測抗體、酶標(biao)二(er)抗、底物溶液、終止(zhi)液、洗(xi)滌液等(deng)。未開封(feng)的(de)試劑(ji)盒(he)應(ying)保存在(zai)2-8℃,開(kai)封(feng)後部分組(zu)分需按(an)照(zhao)說明書(shu)要求進行(xing)保(bao)存,如(ru)標(biao)準(zhun)品(pin)需(xu)-20℃保存,其他(ta)組(zu)分4℃保存。
實驗操作(zuo)步(bu)驟
1.樣本準(zhun)備(bei):根據試劑盒(he)要求準(zhun)備(bei)樣本,如(ru)血清、血漿、細胞培養(yang)上清等(deng)。
2.加樣:將(jiang)樣本和(he)標(biao)準(zhun)品(pin)加入預包被(bei)抗體的(de)微(wei)孔(kong)板(ban)中。
3.孵(fu)育(yu):在(zai)37℃下孵(fu)育(yu)壹(yi)定時間(jian),通(tong)常為(wei)1-2小(xiao)時。
4.洗(xi)滌:用洗(xi)滌液洗(xi)滌微(wei)孔(kong)板(ban),去(qu)除未結(jie)合的(de)成(cheng)分。
5.加入酶標二(er)抗:加入酶標二(er)抗後(hou)再次(ci)孵(fu)育(yu)。
6.顯(xian)色(se)反應(ying):加入底物溶液,觀(guan)察(cha)顯(xian)色(se)反應(ying)。
7.終止(zhi)反應(ying):加入終止(zhi)液,終止(zhi)顯(xian)色(se)反應(ying)。
8.讀(du)數:用(yong)酶(mei)標儀(yi)在(zai)450nm波長(chang)下測定(ding)吸光(guang)度(du)(OD值),通(tong)過(guo)標準(zhun)曲(qu)線(xian)計算(suan)樣本中(zhong)目標分子的(de)濃度(du)。
註(zhu)意事項
1.樣本處理(li):樣本應(ying)避免反復凍(dong)融(rong),血清樣本應(ying)離(li)心去(qu)除紅細胞。
2.孵(fu)育(yu)條(tiao)件(jian):嚴(yan)格(ge)控(kong)制(zhi)孵(fu)育(yu)溫度和時間(jian),避免偏差。
3.洗滌步(bu)驟:充(chong)分洗滌微(wei)孔(kong)板(ban),確保(bao)未結(jie)合成(cheng)分被(bei)去(qu)除。
4.試劑(ji)保存:嚴(yan)格(ge)按(an)照(zhao)說明書(shu)要求保存試(shi)劑(ji),避免試劑失效(xiao)。