上(shang)海(hai)ELISA試(shi)劑盒(he)自(zi)從60-70年代問(wen)世(shi)以來，得(de)到(dao)世(shi)界(jie)科(ke)研(yan)工(gong)作者(zhe)的(de)認可(ke)及(ji)推(tui)崇(chong)，在歐美及(ji)中(zhong)國獲得很(hen)大(da)的(de)推(tui)廣，尤(you)其是國內生化(hua)領域(yu)的(de)長(chang)足(zu)發(fa)展。
檢測上(shang)海(hai)ELISA試(shi)劑盒(he)結(jie)果必(bi)要(yao)條件可(ke)分為三(san)個：
1、ELISA加樣(yang)步驟
在ELISA中(zhong)壹(yi)般有(you)3次加樣(yang)步聚(ju)，即(ji)加(jia)標(biao)本，加(jia)酶結(jie)合物(wu)，加(jia)底(di)物。凍(dong)結(jie)血清融(rong)解(jie)後(hou)，蛋白質(zhi)局(ju)部(bu)濃(nong)縮(suo)，分布(bu)不(bu)均，應(ying)充(chong)分混勻(yun)宜輕緩，避免(mian)氣(qi)泡,可(ke)上(shang)下(xia)倒(dao)置(zhi)混和(he)，不(bu)要在(zai)混勻(yun)器上強烈(lie)振(zhen)蕩。
制(zhi)備(bei)血漿標(biao)本需(xu)借助(zhu)於(yu)抗(kang)凝劑，而(er)血清標(biao)本只(zhi)要待(dai)血清天(tian)然(ran)凝固、待(dai)其收縮(suo)後即(ji)可(ke)取得。也可(ke)在(zai)板(ban)孔(kong)中(zhong)加入(ru)稀(xi)釋(shi)液(ye)，再(zai)在其(qi)加(jia)入(ru)血清標(biao)本，然(ran)後在微型震(zhen)蕩器上(shang)震(zhen)蕩1分鐘(zhong)以保(bao)證(zheng)混和(he)。
壹(yi)般說(shuo)來，在(zai)5天(tian)內測定(ding)的(de)血清標(biao)本可(ke)放置於(yu)4℃，超過(guo)壹(yi)周測定(ding)的(de)需(xu)低(di)溫冰存。可(ke)用(yong)作ELISA測定(ding)的(de)標(biao)本十分廣泛(fan)，體液(ye)、分泌物和排泄(xie)物等均可(ke)作標(biao)本以(yi)測定(ding)其(qi)中(zhong)某(mou)種抗體或抗原成(cheng)份，上海(hai)ELISA試(shi)劑盒(he)中(zhong)本次試(shi)驗不(bu)需(xu)用(yong)的(de)部(bu)分應(ying)及時放回(hui)冰箱(xiang)保(bao)留(liu)。
2、固(gu)相載體
加酶結(jie)合物(wu)應(ying)用(yong)液(ye)和(he)底(di)物用(yong)液(ye)時可(ke)用(yong)定(ding)量多道加(jia)液(ye)器(qi)，使(shi)加(jia)液(ye)過(guo)程迅速(su)完成(cheng)。如有(you)細菌(jun)汙染，菌(jun)體中(zhong)可(ke)能(neng)含有(you)內源性(xing)HRP，也會產(chan)生假陽性(xing)反(fan)應(ying)。每(mei)次加標(biao)本應(ying)更換(huan)吸(xi)嘴(zui)，以(yi)發(fa)生交叉(cha)汙染，也可(ke)用(yong)壹(yi)次性(xing)的(de)定(ding)量塑料管加(jia)樣(yang)。
良好的(de)儀(yi)器和(he)準確(que)的(de)操(cao)縱是(shi)保(bao)證(zheng)上海(hai)ELISA試(shi)劑盒(he)檢測結(jie)果正(zheng)確(que)可(ke)靠(kao)的(de)必要(yao)條件。ELISA頂(ding)用(yong)的(de)蒸餾水(shui)或(huo)去(qu)離(li)子水(shui)，包(bao)括(kuo)用(yong)於洗滌(di)的(de)，應(ying)為新鮮的(de)和高(gao)質(zhi)量的(de)。有(you)些(xie)標(biao)本可(ke)直(zhi)接(jie)進行測定(ding)，有(you)些(xie)則需(xu)經預處理。
3、標(biao)本因(yin)素
血清標(biao)本可(ke)按(an)常(chang)規方(fang)法(fa)采(cai)集，應(ying)留(liu)意(yi)避免(mian)溶(rong)血，紅細胞溶解時會開(kai)釋(shi)出(chu)具(ju)有(you)過(guo)氧(yang)化(hua)物(wu)酶活(huo)性(xing)的(de)物質(zhi)，以(yi)HRP為標(biao)記(ji)的(de)ELISA測定(ding)中(zhong)，溶血標(biao)本可(ke)能(neng)會(hui)增加非(fei)特(te)異性(xing)顯(xian)色(se)。
如在(zai)冰箱(xiang)中(zhong)保(bao)留(liu)過(guo)久(jiu)，其中(zhong)的(de)可(ke)發(fa)生聚(ju)合，在(zai)間(jian)接(jie)法(fa)ELISA中(zhong)可(ke)使(shi)本(ben)底(di)加深(shen)。本文(wen)將(jiang)敘述板式ELISA各(ge)個操(cao)縱步驟的(de)留(liu)意(yi)要點，國外試(shi)劑均與特(te)殊儀(yi)器配(pei)合應(ying)用(yong)，嚴格遵照劃定(ding)操(cao)縱，必(bi)能(neng)得(de)出(chu)正確的(de)結(jie)果。
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更新時間(jian)：2022-10-26 
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