1.穩定(ding)性好(hao):包被(bei)的抗(kang)原(yuan)的穩定(ding)性可(ke)使(shi)試(shi)劑(ji)盒的效(xiao)期得(de)到(dao)保(bao)證(zheng),早(zao)期以(yi)合成肽為包被(bei)抗(kang)原(yuan)的試(shi)劑(ji)盒效(xiao)期只有(you)3-4個(ge)月,采用(yong)基因工程(cheng)抗(kang)原(yuan)後(hou)效(xiao)期大大延長了(le)。
2.基因工程(cheng)抗(kang)原(yuan)將(jiang)特異性抗(kang)原(yuan)決(jue)定(ding)簇基因融合表(biao)達,表(biao)達產(chan)物包(bao)含(han)更(geng)多(duo)的抗(kang)原(yuan)決(jue)定(ding)簇,可(ke)提(ti)高(gao)試(shi)劑(ji)盒的靈(ling)敏(min)度(du),提高(gao)檢出(chu)率(lv)。
3.分(fen)子量大:合成肽采用(yong)化學(xue)方(fang)法(fa)制(zhi)備,由於工(gong)藝(yi)的局(ju)限,合成數量有限(xian),只能(neng)達(da)到數百個(ge)氨基酸(suan)。而利用(yong)基因工程(cheng)制(zhi)備的抗(kang)原(yuan),分(fen)子量更大。
ELISA標(biao)本之(zhi)腦(nao)血(xue)漿(jiang)的稀釋:
1.用(yong)EDTA2K離心收集(ji)在(zai)真空血(xue)液(ye)收(shou)集(ji)管(guan)中(zhong)的血(xue)液(ye),5,000×g,15分(fen)鐘,4℃,分(fen)離(li)血(xue)漿(jiang)樣(yang)品(pin),然後(hou)儲存(cun)在(zai)零下(xia)80℃直到使(shi)用(yong)。
2.用(yong)試劑(ji)盒中(zhong)的標(biao)準稀釋液(ye)5倍稀釋血(xue)漿(jiang)以(yi)避(bi)免血(xue)漿(jiang)中(zhong)的幹擾(rao)物(wu)質(zhi)影響檢測(ce),按(an)照(zhao)說(shuo)明書方(fang)法(fa)檢測(ce)。
ELISA試(shi)劑(ji)盒常(chang)見問題解(jie)析:
1.加(jia)樣(yang)量紛歧(qi)致(zhi)?
解(jie)決(jue)方(fang)法(fa):樣品(pin)稀釋前(qian)應(ying)充(chong)沛混(hun)勻(yun),盡(jin)可(ke)能(neng)運用(yong)同壹移液器(qi)並(bing)裝緊吸(xi)嘴(zui)。
2.樣品(pin)數量多(duo)少(shao)紛(fen)歧(qi),加(jia)樣(yang)時刻(ke)有長(chang)有短?
解(jie)決(jue)方(fang)法(fa):重(zhong)復(fu)某(mou)壹樣品(pin)時,加樣(yang)時刻(ke)盡可(ke)能(neng)與(yu)*次(ci)接(jie)近。
3.保溫(wen)時刻(ke)紛歧(qi)致(zhi),洗(xi)刷條件紛歧(qi)致(zhi),操(cao)作人(ren)員(yuan)紛歧(qi)致(zhi)?
解(jie)決(jue)方(fang)法(fa):重(zhong)復(fu)測定標(biao)本,操作條(tiao)件(jian)、人(ren)員(yuan)等(deng)應(ying)盡可(ke)能(neng)與(yu)前(qian)次(ci)保(bao)持(chi)壹致(zhi),以(yi)掃(sao)除這(zhe)些(xie)要素(su)造(zao)成的紛(fen)歧(qi)致(zhi)的可(ke)能(neng)性。
引起ELISA測定過(guo)錯成果的原(yuan)因主要有:
①標(biao)本要素(su);
②試劑(ji)要素(su);
③操作要素(su)。
ELISA方(fang)法(fa)被廣泛應(ying)用(yong)於各(ge)種抗(kang)原(yuan)和抗(kang)體(ti)測(ce)定(ding)。但(dan)ELISA測定(ding)中影(ying)響要素(su)較多(duo),而(er)且其(qi)操(cao)作中(zhong)有(you)必(bi)定(ding)的技(ji)術(shu)要求,在(zai)檢測(ce)過(guo)程(cheng)中(zhong)除正常反(fan)響外(wai),有經常見到壹些(xie)過(guo)錯的成果。