分(fen)析(xi)測定(ding)-犬(quan)環(huan)氧(yang)合(he)酶(mei)2ELISA試(shi)劑(ji)盒

分(fen)析(xi)測定(ding)-犬(quan)環(huan)氧(yang)合(he)酶(mei)2ELISA試(shi)劑(ji)盒

ELISA試(shi)劑(ji)盒
標本：血(xue)清(qing)、血(xue)漿、細胞(bao)上清(qing)液、尿(niao)液、體(ti)液、灌洗液、腦(nao)脊髓、心(xin)房(fang)水、胸(xiong)房水(shui)、組織等(deng)。
種屬(shu)：人、大鼠(shu)、小鼠(shu)、兔子(zi)、豬、犬(quan)、猴、馬、牛(niu)、羊(yang)、雞、鴨(ya)、魚等(deng)。
用途(tu)：科(ke)研(yan)實驗(yan)等(deng)領域(yu)科學研(yan)究(jiu)，不得(de)用於(yu)臨(lin)床診斷(duan).
特點：靈敏(min)性(xing)高、特(te)異性(xing)強、重復(fu)性(xing)好.

試(shi)劑(ji)盒組成(cheng)及試(shi)劑(ji)配(pei)制 
1. 酶聯(lian)板（Assay plate ）：壹塊(kuai)（96孔(kong)）。 
2. 標準(zhun)品(pin)（Standard）：6瓶(ping)。
3. 生(sheng)物(wu)素標記(ji)抗(kang)體(ti)稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶(ping)。
4. 辣(la)根(gen)過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei)標記(ji)親和素稀(xi)釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶(ping)。
5. 生(sheng)物(wu)素標記(ji)抗(kang)體(ti)（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶(ping)（1：100）
7. 辣(la)根(gen)過(guo)氧(yang)化物(wu)酶(mei)標記(ji)親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶(ping)（1：100）
6. 底(di)物(wu)溶(rong)液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶(ping)。 
7. 濃(nong)洗(xi)滌液（Wash Buffer）：1×30ml/瓶(ping)，使(shi)用時(shi)每(mei)瓶(ping)用蒸(zheng)餾(liu)水稀(xi)釋25倍。 
8. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶(ping)（2N H2SO4）

實驗(yan)原理(li)
用純(chun)化的(de)抗體(ti)包被(bei)微孔(kong)板，制成(cheng)固(gu)相(xiang)載體(ti)，往包被(bei)抗C3抗體(ti)的微孔(kong)中(zhong)依(yi)次(ci)加入標本或(huo)標準(zhun)品(pin)、生(sheng)物素化(hua)的(de)抗(kang)C3抗(kang)體(ti)、HRP標記(ji)的(de)親和素，經(jing)過(guo)*洗滌後用底(di)物(wu)TMB顯(xian)色(se)。TMB在(zai)過氧(yang)化物(wu)酶(mei)的(de)催(cui)化(hua)下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)藍(lan)色，並(bing)在(zai)酸的(de)作(zuo)用下(xia)轉(zhuan)化成(cheng)z終的黃(huang)色(se)。顏(yan)色的深(shen)淺(qian)和(he)樣品中(zhong)的(de)C3呈正(zheng)相(xiang)關。用酶(mei)標儀在450nm波長下(xia)測定吸(xi)光(guang)度(du)(OD值(zhi))，計算樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du)。
標本的(de)采集(ji)及保存(cun)
1. 血(xue)清(qing)：全血標本請(qing)於(yu)室(shi)溫放置(zhi)2小(xiao)時(shi)或(huo)4℃過(guo)夜後於(yu)1000 x g離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)，取上清(qing)即可(ke)檢測(ce)，或將標本放(fang)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存，但(dan)應避(bi)免反復(fu)凍融(rong)。
2. 血(xue)漿：可(ke)用EDTA或(huo)肝(gan)素作(zuo)為抗(kang)凝劑，標本采集(ji)後30分(fen)鐘(zhong)內(nei)於(yu)2 - 8° C 1000 x g離(li)心(xin)15分(fen)鐘(zhong)，或將標本放(fang)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存，但(dan)應避(bi)免反復(fu)凍融(rong)。
3. 細胞(bao)培養(yang)物上清(qing)或(huo)其它(ta)生物(wu)標本：請(qing)1000 x g離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)，取上清(qing)即可(ke)檢測(ce)，或將標本放(fang)於(yu)-20℃或(huo)-80℃保(bao)存，但(dan)應避(bi)免反復(fu)凍融(rong)。
4. 樣(yang)本處理(li)：血(xue)清(qing)或(huo)血漿標本推(tui)薦稀(xi)釋10,000倍。
 

ELISA試(shi)劑(ji)盒操作(zuo)註(zhu)意事項(xiang)：
1）試(shi)劑(ji)應按標簽說(shuo)明(ming)書儲(chu)存(cun)，使(shi)用前恢復(fu)到室(shi)溫。稀稀(xi)過後的(de)標準(zhun)品(pin)應(ying)丟棄(qi)，不可(ke)保存(cun)。
2）實驗(yan)中(zhong)不用的(de)板(ban)條應(ying)立即放回包裝袋中(zhong)，密封保(bao)存(cun)，以免變質。
3）不用的(de)其它(ta)試(shi)劑(ji)應包裝好或(huo)蓋(gai)好。不同(tong)批號(hao)的試(shi)劑(ji)不要(yao)混(hun)用。保(bao)質(zhi)前使(shi)用。
4）使(shi)用壹次(ci)性(xing)的(de)吸(xi)頭以(yi)免交叉汙染，吸(xi)取終止液和(he)底(di)物(wu)A、B液時(shi)，避(bi)免使(shi)用帶(dai)金屬部(bu)分(fen)的(de)加樣器(qi)。
5）使(shi)用幹凈的塑料(liao)容器(qi)配(pei)置(zhi)洗(xi)滌液。使(shi)用前充(chong)分(fen)混(hun)勻試(shi)劑(ji)盒裏的各種(zhong)成(cheng)份(fen)及樣品(pin)。
6）洗(xi)滌酶標板(ban)時(shi)應(ying)充(chong)分(fen)拍(pai)幹，不要(yao)將吸水紙直(zhi)接(jie)放入(ru)酶(mei)標反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)吸(xi)水。
7）底(di)物(wu)A應(ying)揮(hui)發(fa)，避(bi)免長時(shi)間(jian)打開蓋(gai)子(zi)。底(di)物(wu)B對(dui)光(guang)敏(min)感(gan)，避(bi)免長時(shi)間(jian)暴露(lu)於(yu)光(guang)下(xia)。避(bi)免用手(shou)接(jie)觸，有(you)毒(du)。實驗(yan)完成(cheng)後應(ying)立即讀取OD值(zhi)。
8）加入試(shi)劑(ji)的順序應壹致(zhi)，以保證(zheng)所有(you)反(fan)應(ying)板(ban)孔(kong)溫育的(de)時(shi)間(jian)壹樣(yang)。
9）按照(zhao)說(shuo)明(ming)書中(zhong)標明(ming)的時(shi)間(jian)、加液的(de)量(liang)及順序進行溫育操(cao)作(zuo)