大(da)鼠(shu)遲現(xian)抗(kang)原(yuan)ELISA試(shi)劑盒(he)操作(zuo)程(cheng)序(xu)

大鼠(shu)遲現(xian)抗(kang)原(yuan)ELISA試(shi)劑盒(he)操作(zuo)程(cheng)序(xu)

Elisa試(shi)劑(ji)盒 性(xing)能:

 1．準確性(xing)：標準品線性(xing)回歸(gui)與(yu)預期(qi)濃(nong)度相(xiang)關(guan)系(xi)數(shu)R值，大於(yu)等於(yu)0.9900。

 2．靈敏度(du)：z低檢測(ce)濃(nong)度小於(yu)10 pg/ml。

 3．特(te)異(yi)性(xing)：不與(yu)其它(ta)可溶性(xing)結構(gou)類(lei)似(si)物交叉反應。

 4．重(zhong)復(fu)性(xing)：板內、板(ban)間變異系(xi)數(shu)均(jun)小於(yu)15%。

樣(yang)本處理及(ji)要求

1.  血清：將(jiang)收(shou)集(ji)於(yu)血清分離管的全(quan)血標本在室溫放(fang)置2小時(shi)或4℃過(guo)夜(ye)，然(ran)後(hou)1000×g離心20 分鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即可(ke)，或將(jiang)上清(qing)置於(yu)-20℃或-80℃保(bao)存(cun)，但應避免反復(fu)凍(dong)融(rong)。
2.  血漿(jiang)：用(yong)EDTA或肝(gan)素作(zuo)為抗(kang)凝(ning)劑(ji)采(cai)集(ji)標本，並將(jiang)標本在采(cai)集(ji)後(hou)的30分鐘(zhong)內於(yu)2-8℃ 1000×g離心15分鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即可(ke)檢測(ce)，或將(jiang)上清(qing)置於(yu)-20℃或-80℃保(bao)存(cun)，但應避免反復(fu)凍(dong)融(rong)。
3.  組織勻漿(jiang)：用(yong)預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去(qu)除殘(can)留(liu)血液（勻漿(jiang)中裂(lie)解(jie)的紅細胞會影(ying)響測量結果(guo)），稱(cheng)重(zhong)後(hou)將(jiang)組織剪碎。將(jiang)剪碎的組織與(yu)對應體(ti)積的PBS（壹般(ban)按(an)1:9的重(zhong)量體(ti)積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具(ju)體(ti)體(ti)積可根據實(shi)驗需要適當調(tiao)整，並做(zuo)好記錄(lu)。推(tui)薦(jian)在PBS中加(jia)入蛋(dan)白(bai)酶抑制(zhi)劑）加(jia)入玻(bo)璃勻漿(jiang)器(qi)中，於(yu)冰上充分(fen)研(yan)磨(mo)。為了(le)進(jin)壹(yi)步裂(lie)解(jie)組織細胞(bao)，可以(yi)對(dui)勻(yun)漿(jiang)液進(jin)行(xing)超(chao)聲(sheng)破(po)碎(sui)，或反復(fu)凍(dong)融(rong)。後(hou)將(jiang)勻漿(jiang)液於(yu)5000×g離心5~10分鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)檢測。

4.  細(xi)胞(bao)培(pei)養物上(shang)清(qing)或其它(ta)生(sheng)物標(biao)本：請(qing)1000×g離心20分鐘(zhong)，取(qu)上清(qing)即可(ke)檢測(ce)，或將(jiang)上清(qing)置於(yu)-20℃或-80℃保(bao)存(cun)，但應避免反復(fu)凍(dong)融(rong)。

註：標(biao)本溶血會影(ying)響後(hou)檢測結果(guo)，因(yin)此溶(rong)血標本不宜進(jin)行(xing)此項(xiang)檢(jian)測。

【樣本收(shou)集(ji)保(bao)存(cun)】

　　1、血清：使(shi)用(yong)不含(han)熱原(yuan)和(he)內毒(du)素的試管，操作(zuo)過(guo)程(cheng)中避(bi)免(mian)任何細(xi)胞(bao)刺(ci)激，收(shou)集(ji)血液後(hou)，3000轉(zhuan)離心10分鐘(zhong)將(jiang)血清和紅細(xi)胞(bao)迅(xun)速(su)小心(xin)地分(fen)離。

　　2、血漿(jiang)：EDTA、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽(yan)或肝(gan)素抗凝。3000轉(zhuan)離心30分鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。

　　3、細胞(bao)上清(qing)液：3000轉(zhuan)離心10分鐘(zhong)去(qu)除顆粒(li)和(he)聚合物。

　　4、組織勻漿(jiang)：將(jiang)組織加(jia)入適量生(sheng)理(li)鹽(yan)水(shui)搗碎(sui)。3000轉(zhuan)離心10分鐘(zhong)取(qu)上清(qing)。

　　5、保(bao)存(cun)：如(ru)果(guo)樣(yang)本收(shou)集(ji)後(hou)不及(ji)時檢測(ce)，請(qing)按壹次(ci)用(yong)量分裝，凍(dong)存(cun)於(yu)-20℃，避免反復(fu)凍(dong)融(rong)，在室(shi)溫下(xia)解(jie)凍(dong)並確(que)保(bao)樣(yang)品均勻地充分(fen)解(jie)凍(dong)。