人(ren)鐵(tie)調素(su)25ELISA試(shi)劑盒(he)分(fen)析(xi)說(shuo)明(ming)

人(ren)鐵(tie)調素(su)25ELISA試(shi)劑盒(he)分(fen)析(xi)說(shuo)明(ming)
ELISA試劑(ji)盒(he)
標(biao)本(ben)：血清(qing)、血(xue)漿(jiang)、細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液(ye)、尿(niao)液(ye)、體(ti)液(ye)、灌(guan)洗(xi)液(ye)、腦(nao)脊(ji)髓(sui)、心房(fang)水、胸房(fang)水、組織等。
種屬：人(ren)、大(da)鼠、小鼠(shu)、兔(tu)子、豬、犬、猴、馬(ma)、牛、羊(yang)、雞、鴨、魚(yu)等。
用途(tu)：科(ke)研(yan)實驗等領域(yu)科(ke)學(xue)研(yan)究，不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷.
特點(dian)：靈(ling)敏(min)性高(gao)、特異(yi)性強、重復(fu)性好(hao).

試(shi)劑(ji)盒(he)組成及試(shi)劑(ji)配(pei)制(zhi) 
1. 酶(mei)聯(lian)板（Assay plate ）：壹(yi)塊（96孔(kong)）。 
2. 標(biao)準(zhun)品（Standard）：6瓶(ping)。
3. 生(sheng)物(wu)素(su)標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)稀(xi)釋液(ye)（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶(ping)。
4. 辣(la)根過氧化物(wu)酶(mei)標(biao)記(ji)親(qin)和素(su)稀(xi)釋液(ye) （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶(ping)。
5. 生(sheng)物(wu)素(su)標(biao)記(ji)抗(kang)體(ti)（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶(ping)（1：100）
7. 辣(la)根過氧化物(wu)酶(mei)標(biao)記(ji)親(qin)和素(su)（HRP-avidin）：1×120μl/瓶(ping)（1：100）
6. 底物(wu)溶(rong)液(ye)（TMB Substrate）：1×10ml/瓶(ping)。 
7. 濃(nong)洗(xi)滌(di)液(ye)（Wash Buffer）：1×30ml/瓶(ping)，使(shi)用時每(mei)瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
8. 終(zhong)止(zhi)液(ye)（Stop Solution）：1×10ml/瓶(ping)（2N H2SO4）

實驗原理
用(yong)純(chun)化的(de)抗(kang)體(ti)包(bao)被(bei)微(wei)孔板，制(zhi)成(cheng)固(gu)相載體(ti)，往(wang)包(bao)被(bei)抗(kang)C3抗(kang)體(ti)的(de)微(wei)孔中(zhong)依次(ci)加入(ru)標(biao)本(ben)或(huo)標(biao)準(zhun)品、生(sheng)物(wu)素(su)化的(de)抗(kang)C3抗(kang)體(ti)、HRP標(biao)記(ji)的親(qin)和素(su)，經(jing)過*洗(xi)滌(di)後用(yong)底(di)物(wu)TMB顯(xian)色。TMB在過氧化物(wu)酶(mei)的(de)催化下轉(zhuan)化成(cheng)藍(lan)色，並在酸(suan)的作(zuo)用下轉(zhuan)化成(cheng)黃(huang)色。顏(yan)色的深(shen)淺(qian)和樣品(pin)中(zhong)的C3呈正(zheng)相關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm波長(chang)下測(ce)定吸(xi)光度(OD值)，計算樣品(pin)濃(nong)度。
標(biao)本(ben)的采(cai)集及保(bao)存
1. 血(xue)清(qing)：全(quan)血標(biao)本(ben)請於(yu)室(shi)溫放置(zhi)2小時(shi)或(huo)4℃過夜(ye)後(hou)於(yu)1000 x g離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)，或(huo)將標(biao)本(ben)放於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)。
2. 血(xue)漿：可(ke)用(yong)EDTA或(huo)肝素(su)作(zuo)為抗(kang)凝劑，標(biao)本(ben)采集後(hou)30分(fen)鐘(zhong)內(nei)於(yu)2 - 8° C 1000 x g離心(xin)15分(fen)鐘(zhong)，或(huo)將標(biao)本(ben)放於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)。
3. 細(xi)胞(bao)培養(yang)物(wu)上(shang)清(qing)或(huo)其(qi)它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本(ben)：請1000 x g離心(xin)20分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce)，或(huo)將標(biao)本(ben)放於(yu)-20℃或(huo)-80℃保存，但(dan)應避(bi)免反(fan)復(fu)凍融(rong)。
4. 樣(yang)本處(chu)理：血清(qing)或(huo)血漿(jiang)標(biao)本(ben)推薦(jian)稀釋10,000倍。
 

ELISA試劑(ji)盒(he)操作(zuo)註意事(shi)項(xiang)：
1）試劑(ji)應按標(biao)簽(qian)說(shuo)明(ming)書(shu)儲存，使(shi)用前(qian)恢(hui)復(fu)到室(shi)溫。稀稀過後(hou)的(de)標(biao)準(zhun)品應(ying)丟棄(qi)，不(bu)可(ke)保(bao)存。
2）實驗中(zhong)不用的(de)板條(tiao)應(ying)立即(ji)放回包(bao)裝袋中(zhong)，密封保(bao)存，以(yi)免(mian)變(bian)質。
3）不(bu)用(yong)的(de)其(qi)它(ta)試劑應包(bao)裝(zhuang)好(hao)或(huo)蓋好(hao)。不同批號的(de)試劑(ji)不要(yao)混用。保質前(qian)使(shi)用。
4）使(shi)用壹(yi)次(ci)性的(de)吸(xi)頭(tou)以免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)，吸(xi)取(qu)終(zhong)止(zhi)液(ye)和底物(wu)A、B液(ye)時(shi)，避(bi)免(mian)使(shi)用帶金屬部(bu)分(fen)的加樣器(qi)。
5）使(shi)用幹(gan)凈的塑(su)料容(rong)器配(pei)置(zhi)洗(xi)滌(di)液(ye)。使(shi)用前(qian)充(chong)分(fen)混勻(yun)試(shi)劑(ji)盒(he)裏的(de)各種(zhong)成份及樣(yang)品(pin)。
6）洗(xi)滌(di)酶(mei)標(biao)板時應(ying)充(chong)分(fen)拍(pai)幹(gan)，不(bu)要(yao)將(jiang)吸(xi)水紙(zhi)直接(jie)放入(ru)酶(mei)標(biao)反(fan)應(ying)孔(kong)中(zhong)吸(xi)水。
7）底物(wu)A應(ying)揮(hui)發，避免(mian)長(chang)時(shi)間打開(kai)蓋子。底(di)物(wu)B對光敏(min)感，避免(mian)長(chang)時(shi)間暴露(lu)於(yu)光下。避(bi)免用(yong)手(shou)接(jie)觸(chu)，有(you)毒(du)。實驗完成(cheng)後應立即(ji)讀取(qu)OD值。
8）加入試劑(ji)的(de)順序(xu)應(ying)壹(yi)致，以保證(zheng)所有(you)反(fan)應(ying)板孔溫育的時間壹(yi)樣(yang)。
9）按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)中(zhong)標(biao)明(ming)的時(shi)間、加液(ye)的(de)量(liang)及順(shun)序(xu)進(jin)行(xing)溫育操作(zuo)