根據實(shi)驗(yan)物種(zhong)及待(dai)檢樣(yang)品性質(zhi)來選(xuan)擇
科研(yan)ELISA試劑(ji)盒(he)如(ru)果(guo)實(shi)驗(yan)君的(de)實(shi)驗(yan)樣品為(wei)人、小鼠(shu)或(huo)大(da)鼠(shu)樣(yang)品,那麽要(yao)選(xuan)擇壹個合適的(de)試劑(ji)盒(he)相(xiang)對容易(yi),但(dan)如(ru)果(guo)您(nin)的(de)實(shi)驗(yan)樣品來源(yuan)於其他物種(zhong)如(ru)雞(ji)、牛、猴(hou)等,則(ze)市(shi)面(mian)上(shang)能(neng)提供的(de)試劑(ji)盒(he)種(zhong)類(lei)卻(que)很(hen)少(shao)。且不(bu)可輕(qing)信能提供近萬種(zhong)試劑(ji)盒(he),覆(fu)蓋多(duo)物(wu)種(zhong)的(de)供應商(shang)。但(dan)如(ru)果(guo)又(you)非要(yao)檢測這些物種(zhong)的(de)指(zhi)標(biao)時(shi),要(yao)對(dui)待(dai)檢物(wu)(如(ru)有(you)種(zhong)屬(shu)差(cha)異性(xing))進(jin)行同(tong)源(yuan)性分(fen)析以及試劑(ji)盒(he)的(de)種(zhong)屬(shu)交(jiao)叉(cha)反(fan)應數(shu)據(ju)。對於樣品類型而言,壹般的(de)商(shang)業化(hua)試劑(ji)盒(he)都(dou)經過(guo)血(xue)清、血(xue)漿和(he)細胞(bao)培養上(shang)清(qing)液(ye)的(de)驗(yan)證(zheng)。在(zai)選(xuan)擇試劑(ji)盒(he)時(shi),要(yao)詳(xiang)細閱(yue)讀說(shuo)明書(shu),比如(ru)血(xue)漿樣(yang)本(ben)抗(kang)凝劑(ji)的(de)使(shi)用(yong)是(shi)否(fou)與(yu)試劑(ji)盒(he)兼(jian)容。另(ling)外,在某(mou)些情形下(xia)樣品中(zhong)會存(cun)在幹(gan)擾因素(su)比如(ru)溶(rong)血(xue)血(xue)漿、高(gao)脂(zhi)肪含(han)量的(de)樣(yang)品、人抗(kang)鼠(shu)抗(kang)體(HAMA)、細胞(bao)培養上(shang)清(qing)中(zhong)含(han)胎牛血(xue)清等。因此(ci)需根據樣(yang)品來選(xuan)擇試劑(ji)盒(he),必(bi)要(yao)時(shi)還(hai)要(yao)根據樣(yang)本(ben)來(lai)適當優(you)化(hua)。或在(zai)樣品收(shou)集前(qian),先(xian)閱(yue)讀壹些可靠(kao)供應商(shang)試劑(ji)盒(he)的(de)說(shuo)明書(shu)或直(zhi)接(jie)咨詢。如(ru)果(guo)您(nin)的(de)樣(yang)品為(wei)組(zu)織或(huo)細胞(bao)裂(lie)解(jie)物(wu),則(ze)需要(yao)更(geng)謹(jin)慎的(de)選(xuan)擇試劑(ji)盒(he)。市(shi)面(mian)上(shang)大(da)多(duo)數(shu)的(de)商(shang)業化(hua)試劑(ji)盒(he)沒有經過(guo)多(duo)種(zhong)來(lai)源(yuan)組(zu)織樣(yang)本(ben)的(de)驗(yan)證(zheng)。這需要(yao)實(shi)驗(yan)君能理解(jie)不(bu)是所(suo)有(you)試劑(ji)盒(he)所(suo)用(yong)的(de)抗(kang)體對,都(dou)能(neng)特異的(de)從壹堆(dui)裂(lie)解(jie)物(wu)蛋白中(zhong)特異檢出您的(de)目的(de)蛋白,還(hai)要(yao)考慮組(zu)織樣(yang)品的(de)基(ji)質(zhi)效應(Matrix Effect)等。但(dan)如(ru)果(guo)實(shi)驗(yan)君要(yao)了(le)解(jie)組(zu)織樣(yang)品的(de)制(zhi)備問(wen)題(ti),我們另(ling)起(qi)壹文來(lai)總(zong)結。
根據樣(yang)品中(zhong)檢測物水(shui)平來選(xuan)擇
科研(yan)ELISA試劑(ji)盒(he)如(ru)果(guo)實(shi)驗(yan)君對於樣品中(zhong)待(dai)檢物(wu)的(de)水(shui)平沒有任何可(ke)參(can)考的(de)數(shu)據,選(xuan)擇寬(kuan)動(dong)力學(xue)檢測範(fan)圍的(de)試劑(ji)盒(he)。如(ru)果(guo)樣(yang)品中(zhong)待(dai)檢物(wu)的(de)含(han)量很低(di),建(jian)議(yi)選(xuan)擇高(gao)靈(ling)敏度的(de)試劑(ji)盒(he)。為(wei)了降低基(ji)質(zhi)效應,有(you)必(bi)要(yao)用(yong)稀(xi)釋液(ye)至(zhi)少做(zuo)2倍稀(xi)釋。如(ru)果(guo)樣(yang)品中(zhong)待(dai)檢物(wu)含量(liang)遠超(chao)過(guo)試劑(ji)盒(he)的(de)檢測範(fan)圍(標(biao)曲(qu)範(fan)圍), 也(ye)需做(zuo)適當的(de)倍(bei)數稀(xi)釋。在(zai)zui後計(ji)算(suan)結(jie)果(guo)時(shi),需乘(cheng)以相應的(de)稀(xi)釋倍(bei)數。
根據樣(yang)本(ben)可(ke)獲(huo)得(de)性(xing)來選(xuan)擇科研(yan)ELISA試劑(ji)盒(he)
通(tong)常而(er)言,商(shang)業化(hua)試劑(ji)盒(he)的(de)樣(yang)品用(yong)量(liang)都在(zai)50ul或100ul, 但(dan)也有(you)壹些供應商(shang)的(de)試劑(ji)盒(he)對(dui)樣品的(de)用(yong)量(liang)要(yao)求(qiu)可少(shao)至(zhi)10ul。如(ru)果(guo)您(nin)的(de)樣(yang)品很珍(zhen)貴或(huo)較難(nan)獲(huo)取,則(ze)需要(yao)認(ren)真(zhen)考慮試劑(ji)盒(he)對(dui)樣品用(yong)量(liang)的(de)要(yao)求(qiu)。如(ru)果(guo)樣(yang)品量少(shao),且要(yao)做(zuo)多(duo)因子(zi)檢測時更(geng)需謹(jin)慎。
細致(zhi)比較科研(yan)ELISA試劑(ji)盒(he)關鍵(jian)性(xing)技(ji)術(shu)參數
ELISA試劑(ji)盒(he)的(de)關鍵(jian)技(ji)術(shu)參(can)數包(bao)括(kuo)板內(nei)差(cha)異性(xing)、板(ban)間差(cha)異性(xing)、批間差(cha)異性(xing)、重(zhong)復性、特異性(xing)及交(jiao)叉(cha)反(fan)應性(xing)、回(hui)收(shou)率等。如(ru)果(guo)實(shi)驗(yan)君經常(chang)開(kai)展ELISA實(shi)驗(yan),建(jian)議(yi)使(shi)用(yong)同(tong)壹廠(chang)家的(de)試劑(ji)盒(he),這樣可(ke)盡量保(bao)證(zheng)數(shu)據(ju)的(de)重(zhong)復性(當(dang)然前(qian)提是實(shi)驗(yan)條件的(de)壹致性)。對(dui)於科研(yan)用(yong)的(de)定(ding)量ELISA試劑(ji)盒(he),不(bu)同的(de)生(sheng)產(chan)廠(chang)家使(shi)用(yong)的(de)抗(kang)體對、酶(mei)以及底物(wu)、生(sheng)產(chan)工藝和(he)研(yan)發(fa)實(shi)力(li)不(bu)盡相同,自然不(bu)同廠(chang)家試劑(ji)盒(he)測出的(de)數(shu)據會有(you)差(cha)異。