小鼠Elisa試(shi)劑盒(he)操作流(liu)程(cheng)標(biao)準化，新(xin)手也(ye)能輕松上(shang)手

在(zai)生(sheng)命科學研究中(zhong)，小鼠作為(wei)壹(yi)種(zhong)重要(yao)的(de)實(shi)驗動(dong)物(wu)模型(xing)，其(qi)體內各種(zhong)生物(wu)分(fen)子(zi)的檢(jian)測(ce)對(dui)於(yu)揭(jie)示(shi)疾(ji)病(bing)機制、評估(gu)藥(yao)物效(xiao)果以及(ji)研(yan)究生(sheng)理過(guo)程(cheng)具有重(zhong)要(yao)意(yi)義。小鼠ELISA試(shi)劑盒(he)作為(wei)壹(yi)種(zhong)高效(xiao)、靈敏(min)的檢(jian)測(ce)工(gong)具，廣泛(fan)應用於(yu)小(xiao)鼠樣本中(zhong)特定(ding)抗(kang)原(yuan)、抗(kang)體或(huo)生(sheng)物分(fen)子(zi)的定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)。

壹(yi)、小鼠ELISA試(shi)劑盒(he)的(de)功(gong)能與(yu)原(yuan)理(li)

小(xiao)鼠ELISA（酶(mei)聯免(mian)疫吸(xi)附測(ce)定(ding)）試(shi)劑盒(he)基(ji)於抗(kang)原(yuan)抗(kang)體特(te)異(yi)性(xing)結(jie)合的(de)原(yuan)理(li)，通(tong)過(guo)酶(mei)促(cu)反應(ying)實現對(dui)目標(biao)分(fen)子(zi)的定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)。其(qi)核(he)心原(yuan)理(li)是(shi)利(li)用特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體包被在酶(mei)標(biao)板(ban)上(shang)，當(dang)樣本中(zhong)的目標(biao)分(fen)子(zi)與(yu)包被抗(kang)體結(jie)合後，再加(jia)入(ru)酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)二抗(kang)，形成(cheng)“抗(kang)體-抗(kang)原(yuan)-酶(mei)標(biao)記(ji)抗(kang)體”的(de)夾(jia)心復合(he)物(wu)。通(tong)過(guo)加(jia)入(ru)顯色(se)底物(wu)，酶(mei)促(cu)反應(ying)產(chan)生(sheng)的顏色變(bian)化(hua)可以通(tong)過(guo)酶(mei)標(biao)儀(yi)在特(te)定(ding)波(bo)長(chang)下檢(jian)測(ce)，從(cong)而實現對(dui)目標(biao)分(fen)子(zi)的定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)。

例(li)如，Elabscience推出的(de)微(wei)量(liang)法小(xiao)鼠白介(jie)素18（IL-18）ELISA試(shi)劑盒(he)，采用雙(shuang)抗(kang)體夾(jia)心法，檢(jian)測(ce)範(fan)圍為(wei)15.63-1000 pg/mL，靈敏(min)度(du)低至9.38 pg/mL，能夠精(jing)準檢(jian)測(ce)小(xiao)鼠樣本中(zhong)的IL-18。這種(zhong)試(shi)劑盒(he)的(de)檢(jian)測(ce)原(yuan)理(li)是(shi)利(li)用抗(kang)小鼠IL-18抗(kang)體包被酶(mei)標(biao)板(ban)，樣本中(zhong)的IL-18與(yu)包被抗(kang)體結(jie)合後，加(jia)入(ru)生物(wu)素化(hua)的抗(kang)小鼠IL-18抗(kang)體和(he)辣(la)根過(guo)氧(yang)化物酶(mei)標(biao)記(ji)的(de)親和(he)素(su)，最終(zhong)通(tong)過(guo)顯(xian)色反應實(shi)現定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)。

二、小鼠ELISA試(shi)劑盒(he)的(de)用途(tu)：

1.炎(yan)癥(zheng)與(yu)免(mian)疫研究

可用於(yu)檢(jian)測(ce)炎(yan)癥(zheng)相關細胞(bao)因子(zi)，如白介(jie)素（IL）系(xi)列、腫(zhong)瘤(liu)壞死因(yin)子（TNF）等。例(li)如，IL-18在自(zi)身免(mian)疫性疾(ji)病(bing)（如類風(feng)濕(shi)關(guan)節炎、系統(tong)性(xing)紅斑狼(lang)瘡）和感染性炎(yan)癥（如細菌、病(bing)毒(du)感染(ran)引發(fa)的炎癥反(fan)應(ying)）研究中(zhong)具有關(guan)鍵(jian)作用。通(tong)過(guo)檢(jian)測(ce)這些細(xi)胞(bao)因子(zi)的水平，研究人(ren)員可以探(tan)討炎(yan)癥發(fa)生發(fa)展(zhan)的機制(zhi)及(ji)評估(gu)治(zhi)療效(xiao)果。

2.代(dai)謝(xie)性(xing)疾病(bing)研究

在(zai)肥(fei)胖(pang)、糖尿(niao)病(bing)等代(dai)謝(xie)性(xing)疾病(bing)中，某些(xie)細(xi)胞(bao)因子(zi)（如IL-18）參與(yu)調(tiao)節脂肪(fang)細胞(bao)代(dai)謝(xie)和(he)胰島素(su)抵抗(kang)過(guo)程(cheng)。可幫(bang)助研(yan)究人(ren)員深入(ru)研究代(dai)謝(xie)性(xing)疾病(bing)與(yu)免(mian)疫炎癥(zheng)的關聯。

3.腫瘤(liu)研(yan)究

細(xi)胞(bao)因子(zi)在腫瘤(liu)免(mian)疫監視和(he)腫(zhong)瘤(liu)微(wei)環境(jing)調(tiao)控(kong)中發(fa)揮(hui)重(zhong)要(yao)作用。例(li)如，IL-17A在腫(zhong)瘤(liu)發(fa)生發展(zhan)機制和(he)免(mian)疫治(zhi)療效(xiao)果評估(gu)中(zhong)具有重(zhong)要(yao)價(jia)值(zhi)。可用於(yu)檢(jian)測(ce)腫(zhong)瘤(liu)組織(zhi)或(huo)血(xue)清中(zhong)的(de)相關細胞(bao)因子(zi)，為腫瘤(liu)免(mian)疫治(zhi)療策略(lve)的開發提(ti)供(gong)依據(ju)。

4.藥(yao)物研發

在(zai)新(xin)藥(yao)研發(fa)過(guo)程(cheng)中(zhong)，可用於(yu)檢(jian)測(ce)動(dong)物(wu)模型(xing)中(zhong)藥(yao)物(wu)對(dui)特定(ding)生(sheng)物(wu)分(fen)子(zi)表達水平(ping)的影響，為藥物(wu)的(de)抗(kang)炎、免(mian)疫調(tiao)節等作用機(ji)制(zhi)研(yan)究提(ti)供數據(ju)支持。

三、小鼠ELISA試(shi)劑盒(he)的(de)使用方(fang)法：

1.試(shi)劑準備(bei)

所有(you)試(shi)劑需在使用前(qian)恢復(fu)至(zhi)室(shi)溫。例(li)如，濃縮(suo)洗(xi)滌(di)液(ye)需按1:20比例(li)與(yu)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)稀(xi)釋(shi)，底物液A和B使用前(qian)按1:1體積(ji)充分(fen)混合。

2.樣本處(chu)理

根據(ju)試(shi)劑盒(he)說明(ming)書(shu)的要(yao)求，對樣本進(jin)行(xing)處(chu)理。例(li)如，血(xue)清、血(xue)漿(jiang)或(huo)細(xi)胞(bao)培養(yang)上(shang)清等(deng)樣本需按照指(zhi)定(ding)體積(ji)加(jia)入(ru)到酶(mei)標(biao)板(ban)中。

3.操作步驟

-設置(zhi)標(biao)準品孔、樣本孔和空(kong)白孔，分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)相應液體。

-除(chu)空(kong)白孔外，加(jia)入(ru)辣根過(guo)氧(yang)化物酶(mei)（HRP）標(biao)記(ji)的(de)檢(jian)測(ce)抗(kang)體，用封(feng)板(ban)膜(mo)蓋住反應板(ban)，37°C孵(fu)育(yu)。

-洗(xi)板(ban)5次(ci)，確保(bao)移除殘(can)留(liu)液體。

-加(jia)入(ru)底物(wu)混合液，37°C孵(fu)育(yu)後加(jia)入(ru)終(zhong)止液。

-在(zai)450nm波(bo)長(chang)處(chu)用酶(mei)標(biao)儀(yi)讀取各孔吸(xi)光度(du)（OD值(zhi)），通(tong)過(guo)標(biao)準曲線(xian)計算樣本中(zhong)目標(biao)分(fen)子(zi)的濃度(du)。

四(si)、小鼠ELISA試(shi)劑盒(he)的(de)優勢(shi)：

-高靈(ling)敏(min)度(du)：能夠檢(jian)測(ce)低豐度(du)的(de)目(mu)標(biao)分(fen)子(zi)，例(li)如，某些(xie)試(shi)劑盒(he)的(de)檢(jian)測(ce)限(xian)可達15.6 pg/mL。

-高特(te)異(yi)性(xing)：采用高特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體對(dui)，與(yu)其(qi)他細胞(bao)因子(zi)交(jiao)叉反應極(ji)低。

-微(wei)量(liang)樣本需求：部(bu)分(fen)試(shi)劑盒(he)僅(jin)需25-50μL樣本，適(shi)合(he)珍(zhen)貴(gui)樣本或(huo)微(wei)量(liang)樣本檢(jian)測(ce)。

-操作簡(jian)便(bian)：配(pei)套試(shi)劑齊(qi)全，操作流(liu)程(cheng)標(biao)準化，新(xin)手也(ye)能輕松上(shang)手。

-快(kuai)速檢(jian)測(ce)：從(cong)樣本處(chu)理到(dao)結(jie)果讀(du)取，通(tong)常(chang)僅需3.5-4小時。