人(ren)ELISA試劑盒在臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)和治療中(zhong)的應(ying)用也將(jiang)更(geng)加(jia)廣泛(fan)。未(wei)來,將(jiang)繼(ji)續(xu)朝(chao)著(zhe)更(geng)高(gao)靈(ling)敏(min)度(du)、更(geng)高(gao)效(xiao)率(lv)和更(geng)廣應(ying)用範圍的方向(xiang)發展,在(zai)醫(yi)學(xue)研(yan)究和臨床(chuang)診斷中發揮著(zhe)不可替代(dai)的作用。了(le)解(jie)其(qi)基(ji)本(ben)原理、操(cao)作流(liu)程(cheng)和應用範圍,對(dui)於(yu)科研(yan)人(ren)員和臨床(chuang)醫(yi)生來說(shuo)都(dou)是非(fei)常重要(yao)的。
人(ren)ELISA試(shi)劑盒的儲(chu)存(cun)方法:
1.儲存條件(jian):
-儲(chu)存(cun)指(zhi)南(nan)。通(tong)常(chang),未開封的試(shi)劑盒應該(gai)保(bao)存(cun)在(zai)2-8℃的冷(leng)藏(zang)環境中。
-避(bi)免將(jiang)試(shi)劑盒暴露在特(te)殊溫(wen)度(du)下,如高(gao)溫(wen)、直(zhi)接(jie)陽光照(zhao)射(she)或(huo)冷(leng)凍(dong)條件(jian)下。
-對(dui)於(yu)某(mou)些敏(min)感(gan)的組(zu)分,可能需要(yao)避(bi)光保(bao)存(cun)。
2.避(bi)免(mian)汙染(ran):
-在操(cao)作過(guo)程中,始(shi)終佩(pei)戴(dai)手套(tao)和實驗室(shi)外套,以(yi)減少交(jiao)叉(cha)汙染(ran)的風(feng)險(xian)。
-使用無菌技術操(cao)作所(suo)有(you)試(shi)劑和樣(yang)本。
-避(bi)免(mian)試(shi)劑與(yu)皮(pi)膚(fu)或(huo)眼(yan)睛(jing)接(jie)觸(chu),如果發生(sheng)接(jie)觸(chu),立即用大(da)量(liang)清水(shui)沖(chong)洗。
3.正(zheng)確使用:
-嚴格(ge)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書進(jin)行(xing)操作,不要(yao)隨意更(geng)改(gai)實驗步(bu)驟(zhou)或(huo)條(tiao)件(jian)。
-使用前檢(jian)查(zha)試(shi)劑是否有(you)異(yi)常顏(yan)色(se)、渾濁(zhuo)或(huo)沈(chen)澱(dian)物,這(zhe)些都(dou)可能是試劑變質(zhi)的跡(ji)象(xiang)。
4.分裝(zhuang)和保(bao)存(cun):
-如果試劑需要(yao)分裝(zhuang),確保(bao)使用無菌容(rong)器(qi),並標記好分裝(zhuang)日期和內容(rong)。
-分裝(zhuang)後(hou)的試(shi)劑應(ying)盡(jin)快使用或(huo)按(an)照(zhao)制造(zao)商的建議儲存。
人ELISA試(shi)劑盒的操(cao)作流(liu)程(cheng):
1.樣(yang)本準備:根據實驗需求(qiu)采集並處理樣(yang)本,如離心、稀(xi)釋等。
2.加樣(yang):將(jiang)標準品和待測(ce)樣(yang)本加(jia)入(ru)預包(bao)被(bei)板中(zhong)。
3.孵(fu)育:在(zai)壹(yi)定(ding)溫(wen)度(du)下孵育壹(yi)定(ding)時(shi)間(jian),使抗原與(yu)抗體(ti)充(chong)分結合(he)。
4.洗滌:去(qu)除未(wei)結(jie)合的物(wu)質(zhi),減少非(fei)特異(yi)性(xing)結合(he)。
5.加(jia)檢(jian)測(ce)抗(kang)體:加入(ru)生物素(su)化(hua)檢(jian)測(ce)抗(kang)體,繼(ji)續(xu)孵(fu)育。
6.加(jia)酶標記物(wu):加(jia)入(ru)酶標記的鏈(lian)黴(mei)親和素。
7.顯色(se)反(fan)應(ying):加(jia)入(ru)底物溶(rong)液,避(bi)光顯色(se)。
8.終止反(fan)應(ying):加(jia)入(ru)終止液,終止反(fan)應(ying)。
9.讀(du)數(shu):使用酶標儀在(zai)450nm波(bo)長處(chu)讀(du)取(qu)吸光度(du)值,繪制標準曲線並計算樣(yang)本濃度(du)。