黃尿酸(suan)（xanthurenic acid）ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)（競(jing)爭法(fa)）的原(yuan)理(li)與(yu)應用(yong)是(shi)什(shen)麽(me)？

黃尿酸(suan)（xanthurenic acid）ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)（競(jing)爭法(fa)）的原(yuan)理(li)與(yu)應用(yong)是(shi)什(shen)麽(me)？

黃尿酸(suan)（xanthurenic acid）ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)（競(jing)爭法(fa)）的原(yuan)理(li)與(yu)應用(yong)可(ke)總(zong)結(jie)如(ru)下(xia)：

壹(yi)、檢(jian)測(ce)原(yuan)理(li)

采(cai)用(yong)競爭法(fa)酶聯(lian)免(mian)疫(yi)吸附技術(shu)，預先包(bao)被黃尿酸(suan)抗原(yuan)的(de)微孔(kong)板中(zhong)依次加(jia)入樣本、標(biao)準品及(ji)HRP標(biao)記(ji)的(de)競(jing)爭抗(kang)原(yuan)，經(jing)溫育(yu)洗(xi)滌(di)後(hou)，通過TMB顯色(se)反應(ying)（藍色→黃色）實現(xian)檢(jian)測(ce)。樣本中(zhong)黃尿酸(suan)濃度與顏(yan)色深(shen)度呈負相關，最終通過測(ce)定(ding)450nm處OD值計算(suan)濃度.

二、樣本處(chu)理(li)與(yu)保存(cun)

1. ‌樣本類(lei)型(xing)‌：支(zhi)持血清(qing)、血漿(jiang)、唾液、尿液等。

2. ‌處(chu)理(li)方(fang)法(fa)‌：

• 血清(qing)需避免細胞刺激(ji)，3000rpm離心10分鐘分離；

• 其(qi)他液體樣本需(xu)去除(chu)雜(za)質(zhi)後分裝凍存(cun)（-20℃或-80℃）。

五(wu)、註(zhu)意事項

1. ‌保(bao)存(cun)條(tiao)件‌：未開封(feng)試(shi)劑(ji)盒(he)需(xu)避光保(bao)存(cun)於(yu)2-8℃，開封(feng)後(hou)需按(an)組分要求分裝；

2. ‌適(shi)用性驗證‌：建議預實(shi)驗(yan)確(que)認(ren)樣本稀釋(shi)比(bi)例(li)及(ji)檢(jian)測(ce)線(xian)性範(fan)圍(wei)；

3. ‌檢(jian)測(ce)靈敏度‌：競(jing)爭法(fa)通常靈敏度為(wei)10-50pg/mL，需(xu)結(jie)合超靈敏試(shi)劑(ji)盒(he)（如(ru)化學發光法(fa)）檢(jian)測(ce)低(di)濃度樣本。

文(wen)獻(xian)支持：

The Gut Microbiota-Xanthurenic Acid-Aromatic Hydrocarbon Receptor Axis Mediates the Anticolitic Effects of Trilobatin

影(ying)響因子(zi)：17.521

結(jie)果判斷(duan) 

1. 15分鐘內在波(bo)長450nm的(de)酶標儀上(shang)讀(du)取(qu)各(ge)孔(kong)的OD值(zhi)； 

2. 百分結合率計算(suan)：設S0管(guan)計(ji)數為B0，各(ge)標準(zhun)管(guan)或樣品管計數為B，非(fei)特異(yi)管(guan)計數為NSB，則百(bai)分結合率 計算(suan)公(gong)式如(ru)下(xia)：B/B0=(B－NSB)/(B0－NSB)×100%

3. logit計(ji)算(suan):各標(biao)準(zhun)點或樣品管的logit值(zhi)計(ji)算(suan)公(gong)式如(ru)下(xia):logit=ln(B/B0)/(1－B/B0)

4. 將(jiang)標(biao)準品的OD均(jun)值與(yu)標準品0點的OD均(jun)相除(chu)，為(wei)標(biao)準(zhun)點的百分結合率，在log-logit坐(zuo)標(biao)紙上(shang)繪圖(tu)。 

5. Log-logit雙(shuang)對(dui)數標準(zhun)曲(qu)線(xian)：坐(zuo)標(biao)紙上(shang)橫(heng)軸從(cong)左(zuo)至(zhi)右(you)第壹(yi)個1-9表(biao)示為(wei)第(di)壹(yi)個10進位，第二(er)個1-9表(biao)示 為(wei)第(di)二(er)個10進位。第三(san)個1-9表(biao)示為(wei)第(di)三(san)個10進位。坐(zuo)標(biao)紙縱(zong)軸為(wei)百(bai)分比（1-99），即(ji)各標(biao)準吸(xi)光值(zhi)的(de)百 分結合率。取壹(yi)條(tiao)通過各點的直(zhi)線(xian)。要求盡(jin)可(ke)能(neng)多(duo)的點在線(xian)上(shang)，同時剩(sheng)余的點均(jun)勻(yun)分布在直(zhi)線(xian)的兩邊。樣 品也(ye)同樣由(you)吸(xi)光值(zhi)計(ji)算(suan)百分結合率，再從(cong)縱軸上(shang)的(de)相應結合率找(zhao)到直(zhi)線(xian)上(shang)的(de)點，此(ci)點對應的(de)橫(heng)坐(zuo)標(biao)濃度即(ji) 為樣品的濃度，無須換(huan)算(suan)。 

6. 人工(gong)處(chu)理(li)：以(yi)標準(zhun)濃度取log值(zhi)為橫(heng)坐(zuo)標(biao)，對(dui)應(ying)的logit值為縱坐(zuo)標(biao)在(zai)普(pu)通坐(zuo)標(biao)紙上(shang)或以標準濃度為橫(heng) 坐(zuo)標(biao)，對(dui)應(ying)的B/B0為縱坐(zuo)標(biao)在(zai)logit-log坐(zuo)標(biao)紙上(shang)畫(hua)出(chu)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)（理(li)想化時是壹(yi)條(tiao)直(zhi)線(xian)）。根據待(dai)測(ce)樣品 的B/B0可以(yi)從(cong)坐(zuo)標(biao)紙上(shang)查出(chu)樣品的濃度值。如(ru)果使用(yong)普通坐(zuo)標(biao)紙，查出(chu)的(de)數值應(ying)取反(fan)對(dui)數才是(shi)最後(hou)的(de)濃度 值。 

7.8. 9. 自(zi)動(dong)處理(li)：使用(yong)logit-log或四(si)參(can)數數據處(chu)理(li)模式(shi)，由(you)電(dian)腦(nao)自(zi)動(dong)計算(suan)得出(chu)結果。 敏感(gan)度(du)：0.1 PPb。

試(shi)劑(ji)盒(he)性(xing)能(neng) 

1. 準(zhun)確(que)性(xing)：標準品線(xian)性回(hui)歸與(yu)預期(qi)濃度相關系(xi)數 R 值，大(da)於(yu)等於(yu) 0.9900。

2. 靈敏度：檢(jian)測(ce)濃度小(xiao)於 0.1 PPb。

3. 特異(yi)性(xing)：不與(yu)其(qi)它(ta)可溶(rong)性(xing)結(jie)構類(lei)似(si)物交(jiao)叉(cha)反應(ying)。

4. 重復(fu)性(xing)：板內、板間變(bian)異(yi)系(xi)數均(jun)小(xiao)於 15%。