大(da)鼠ELISA試(shi)劑盒具有靈(ling)敏度(du)高、專(zhuan)壹性強等優點(dian)

大(da)鼠(shu)ELISA試(shi)劑盒是壹(yi)種(zhong)重(zhong)要的生物(wu)學實(shi)驗(yan)工具，以(yi)下(xia)是對(dui)其的詳細(xi)介(jie)紹：

壹、概念

大鼠ELISA試(shi)劑盒是通過(guo)酶(mei)聯免疫吸附(fu)反(fan)應（ELISA）實(shi)驗(yan)來(lai)檢(jian)測(ce)大鼠(shu)血清(qing)、血漿、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)上清(qing)液(ye)等(deng)樣(yang)品(pin)中特(te)定(ding)生(sheng)物(wu)分子（如(ru)蛋白質(zhi)、抗(kang)原等(deng)）的含(han)量(liang)的試(shi)劑盒。通過(guo)使(shi)用(yong)ELISA技術(shu)，可(ke)以(yi)對大(da)鼠(shu)樣(yang)品(pin)中的目標(biao)分子進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)或(huo)半(ban)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)，具有(you)快速、準(zhun)確(que)、敏感(gan)的特(te)點(dian)。

二、大鼠Elisa試(shi)劑盒基本原理

1.抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)與酶(mei)的結合(he)：抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)可(ke)通過(guo)共價(jia)鍵(jian)與酶(mei)連接(jie)形(xing)成酶(mei)結合(he)物，而此(ci)種(zhong)酶(mei)結合(he)物仍能(neng)保持(chi)其免(mian)疫學和酶(mei)學活性(xing)。

2.抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)的吸附(fu)：抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)能以(yi)物理(li)性(xing)地(di)吸附(fu)於固(gu)相載(zai)體(ti)表(biao)面(mian)，可(ke)能是蛋(dan)白和聚(ju)苯(ben)表(biao)面(mian)間的疏水(shui)性(xing)部(bu)分相互吸附(fu)，並(bing)保持(chi)其免(mian)疫學活性(xing)。

3.酶(mei)促(cu)反(fan)應與(yu)顏(yan)色(se)變化(hua)：酶(mei)結合(he)物與相應抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)結合(he)後，加(jia)入底(di)物(wu)會(hui)產(chan)生(sheng)顏(yan)色(se)反(fan)應，顏(yan)色(se)反(fan)應的深淺與標(biao)本中相應抗(kang)原或(huo)抗(kang)體(ti)的量(liang)成正比(bi)例(li)，因此(ci)可(ke)以(yi)按(an)底(di)物(wu)顯(xian)色(se)的程度(du)判定(ding)結果(guo)。

三、操(cao)作(zuo)步驟(zhou)

1.編號：將(jiang)樣(yang)品(pin)對應微(wei)孔(kong)按(an)序編號，每板應設(she)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)2孔(kong)、陽(yang)性對照(zhao)2孔(kong)、空(kong)白對照(zhao)1孔(kong)。

2.加(jia)樣(yang)：分別(bie)在(zai)陰(yin)、陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)孔(kong)中(zhong)加(jia)入陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)、陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)50µl。加(jia)樣(yang)品(pin)稀釋液(ye)40µl，然(ran)後再(zai)加(jia)待測(ce)樣(yang)品(pin)10µl。

3.溫育：用(yong)封(feng)板膜(mo)封(feng)板後置37℃溫(wen)育30分鐘(zhong)。

4.配(pei)液(ye)：將(jiang)30倍(bei)濃(nong)縮洗(xi)滌液(ye)用(yong)蒸餾(liu)水(shui)30倍(bei)稀釋(shi)後備用(yong)。

5.洗(xi)滌：小心揭掉封(feng)板膜(mo)，棄(qi)去液(ye)體(ti)，甩(shuai)幹，每孔(kong)加(jia)滿洗(xi)滌液(ye)，靜置(zhi)30秒後棄(qi)去，如(ru)此(ci)重(zhong)復5次，拍幹。

6.加(jia)酶(mei)：每孔(kong)加(jia)入酶(mei)標(biao)試(shi)劑50µl，空白孔(kong)除外(wai)。

7.再(zai)溫(wen)育：操(cao)作(zuo)同(tong)第(di)3步。

8.再(zai)洗(xi)滌：操作(zuo)同(tong)第(di)5步。

9.顯(xian)色(se)：每孔(kong)先(xian)加(jia)入顯(xian)色(se)劑A50µl，再(zai)加(jia)入顯(xian)色(se)劑B50µl，輕輕(qing)震蕩(dang)混(hun)勻，37℃避光顯(xian)色(se)。

10.終止(zhi)：每(mei)孔(kong)加(jia)終止(zhi)液(ye)50µl，終(zhong)止(zhi)反(fan)應（此(ci)時藍(lan)色(se)立(li)轉黃(huang)色(se)）。

11.測(ce)定(ding)：以(yi)空白空調(tiao)零(ling)，450nm波長(chang)依(yi)序測(ce)量(liang)各孔(kong)的吸光度(du)（OD值）。測(ce)定(ding)應在(zai)加(jia)終止(zhi)液(ye)後15分鐘(zhong)以(yi)內進(jin)行(xing)。

四(si)、應用(yong)領域(yu)

1.疾病模型和藥(yao)效評(ping)價(jia)：用於檢(jian)測(ce)大鼠(shu)體(ti)內的各種(zhong)生(sheng)物(wu)分子，如(ru)細(xi)胞(bao)因子、白細(xi)胞(bao)介(jie)素(su)、抗(kang)體(ti)、荷爾蒙等，這(zhe)些(xie)分子的含(han)量(liang)和(he)活(huo)性(xing)波動(dong)與(yu)大(da)鼠(shu)的生理(li)狀(zhuang)態(tai)和(he)疾(ji)病有(you)著密切關系。

2.生物(wu)分子檢(jian)測(ce)：用於研(yan)究(jiu)生物(wu)分子在生理和(he)病理(li)條(tiao)件(jian)下(xia)的變化(hua)和(he)功(gong)能(neng)。

3.免疫學研(yan)究(jiu)：用於研(yan)究(jiu)大鼠(shu)的免疫(yi)應答(da)和免疫(yi)調節(jie)，檢(jian)測(ce)大鼠(shu)體(ti)內的抗(kang)體(ti)、免疫(yi)細(xi)胞(bao)因子等免疫相關分子的含(han)量(liang)和(he)活(huo)性(xing)。

4.藥(yao)物篩(shai)選：通過(guo)檢(jian)測(ce)藥物(wu)對生(sheng)物分子的影響，篩(shai)選出(chu)具(ju)有潛在治(zhi)療(liao)作(zuo)用(yong)的藥物(wu)。

五(wu)、優點

大(da)鼠ELISA試(shi)劑盒具有靈(ling)敏度(du)高、專(zhuan)壹性強、重(zhong)復性好(hao)、操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian)等(deng)優(you)點，使其成為生(sheng)物(wu)醫學研(yan)究(jiu)中實(shi)驗(yan)工具。

綜(zong)上(shang)所述(shu)，大(da)鼠(shu)ELISA試(shi)劑盒在生物(wu)醫學研(yan)究(jiu)中發(fa)揮(hui)著重(zhong)要作(zuo)用(yong)，其(qi)應用(yong)廣(guang)泛(fan)且(qie)操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian)，為科(ke)研(yan)人員提供了有力的支持(chi)。