雞(ji)表(biao)皮生(sheng)長因子ELISA試劑(ji)盒(he)分析(xi)說(shuo)明(ming)書

雞(ji)表(biao)皮生(sheng)長因子ELISA試劑(ji)盒(he)分析(xi)說(shuo)明(ming)書

ELISA試劑(ji)盒(he)
標本：血(xue)清、血(xue)漿(jiang)、細胞(bao)上清(qing)液、尿液、體(ti)液、灌(guan)洗液、腦(nao)脊(ji)髓(sui)、心(xin)房(fang)水、胸(xiong)房(fang)水、組織等。
種(zhong)屬(shu)：人、大鼠、小鼠(shu)、兔(tu)子、豬(zhu)、犬(quan)、猴、馬、牛、羊、雞(ji)、鴨、魚(yu)等。
用途(tu)：科研實驗(yan)等領域科學研(yan)究，不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床診(zhen)斷.
特點：靈(ling)敏性高(gao)、特異(yi)性強(qiang)、重(zhong)復性好(hao).

試劑(ji)盒(he)組成(cheng)及(ji)試(shi)劑(ji)配制(zhi) 
1. 酶聯板(ban)（Assay plate ）：壹(yi)塊（96孔）。 
2. 標準品（Standard）：6瓶(ping)。
3. 生(sheng)物(wu)素(su)標(biao)記(ji)抗體稀(xi)釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶(ping)。
4. 辣(la)根(gen)過(guo)氧化物(wu)酶(mei)標(biao)記(ji)親(qin)和(he)素(su)稀(xi)釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶(ping)。
5. 生(sheng)物(wu)素(su)標(biao)記(ji)抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根(gen)過(guo)氧化物(wu)酶(mei)標(biao)記(ji)親(qin)和(he)素(su)（HRP-avidin）：1×120μl/瓶(ping)（1：100）
6. 底物(wu)溶(rong)液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶(ping)。 
7. 濃(nong)洗(xi)滌液（Wash Buffer）：1×30ml/瓶(ping)，使(shi)用時(shi)每(mei)瓶用蒸餾(liu)水稀(xi)釋25倍(bei)。 
8. 終(zhong)止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶(ping)（2N H2SO4）

實驗(yan)原理
用純(chun)化(hua)的(de)抗體包被微(wei)孔板(ban)，制(zhi)成固相(xiang)載體(ti)，往(wang)包被抗C3抗體的(de)微(wei)孔中(zhong)依次加(jia)入(ru)標本或標準(zhun)品、生(sheng)物(wu)素(su)化(hua)的(de)抗C3抗體、HRP標記(ji)的(de)親(qin)和(he)素(su)，經過(guo)*洗(xi)滌後用底物(wu)TMB顯(xian)色(se)。TMB在(zai)過(guo)氧化物(wu)酶(mei)的(de)催(cui)化(hua)下轉化成(cheng)藍(lan)色(se)，並(bing)在(zai)酸的(de)作(zuo)用下(xia)轉化成(cheng)z終的(de)黃色。顏(yan)色的(de)深(shen)淺和(he)樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)C3呈(cheng)正(zheng)相關(guan)。用酶(mei)標(biao)儀在450nm波長下測定吸光度(du)(OD值)，計(ji)算(suan)樣品(pin)濃(nong)度(du)。
標本的(de)采(cai)集(ji)及(ji)保(bao)存(cun)
1. 血(xue)清：全(quan)血(xue)標本請(qing)於室(shi)溫放(fang)置2小時(shi)或4℃過(guo)夜(ye)後於(yu)1000 x g離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即可(ke)檢(jian)測，或將標本放(fang)於(yu)-20℃或-80℃保(bao)存(cun)，但應避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong)。
2. 血(xue)漿(jiang)：可(ke)用EDTA或肝素(su)作(zuo)為抗凝(ning)劑(ji)，標本采(cai)集(ji)後30分(fen)鐘(zhong)內於(yu)2 - 8° C 1000 x g離(li)心(xin)15分(fen)鐘(zhong)，或將標本放(fang)於(yu)-20℃或-80℃保(bao)存(cun)，但應避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong)。
3. 細胞培(pei)養物(wu)上(shang)清(qing)或其它(ta)生(sheng)物(wu)標(biao)本：請(qing)1000 x g離(li)心(xin)20分(fen)鐘(zhong)，取上(shang)清(qing)即可(ke)檢(jian)測，或將標本放(fang)於(yu)-20℃或-80℃保(bao)存(cun)，但應避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong)。
4. 樣本處(chu)理：血(xue)清或血(xue)漿(jiang)標本推(tui)薦(jian)稀(xi)釋10,000倍(bei)。
 

ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)操作(zuo)註意事項(xiang)：
1）試(shi)劑(ji)應按(an)標(biao)簽(qian)說(shuo)明(ming)書儲存，使(shi)用前恢(hui)復(fu)到室(shi)溫。稀(xi)稀(xi)過(guo)後的(de)標(biao)準(zhun)品應丟(diu)棄(qi)，不(bu)可(ke)保(bao)存(cun)。
2）實驗(yan)中(zhong)不(bu)用的(de)板(ban)條(tiao)應立(li)即放(fang)回包裝(zhuang)袋(dai)中(zhong)，密(mi)封保(bao)存(cun)，以免變質(zhi)。
3）不(bu)用的(de)其(qi)它(ta)試劑(ji)應包裝(zhuang)好(hao)或蓋好(hao)。不(bu)同(tong)批號的(de)試(shi)劑(ji)不(bu)要混(hun)用。保(bao)質(zhi)前使(shi)用。
4）使(shi)用壹(yi)次(ci)性的(de)吸(xi)頭以免交(jiao)叉汙(wu)染，吸取終(zhong)止(zhi)液和(he)底物(wu)A、B液時(shi)，避(bi)免使(shi)用帶(dai)金屬(shu)部分的(de)加(jia)樣(yang)器。
5）使(shi)用幹凈的(de)塑料容(rong)器配(pei)置洗滌液。使(shi)用前充(chong)分混(hun)勻(yun)試劑(ji)盒(he)裏(li)的(de)各種(zhong)成(cheng)份(fen)及(ji)樣(yang)品(pin)。
6）洗滌酶標板(ban)時(shi)應充(chong)分拍(pai)幹，不(bu)要將吸水紙直接放(fang)入(ru)酶(mei)標(biao)反(fan)應孔中(zhong)吸水。
7）底物(wu)A應揮(hui)發(fa)，避免(mian)長時間(jian)打(da)開蓋子。底物(wu)B對(dui)光敏感(gan)，避(bi)免長時間(jian)暴(bao)露於(yu)光下。避(bi)免用手接觸(chu)，有毒(du)。實驗(yan)完(wan)成(cheng)後應立(li)即讀取OD值。
8）加(jia)入(ru)試劑(ji)的(de)順(shun)序(xu)應壹(yi)致(zhi)，以保(bao)證(zheng)所有(you)反(fan)應板(ban)孔溫育的(de)時(shi)間(jian)壹樣(yang)。
9）按照說明(ming)書中(zhong)標明(ming)的(de)時(shi)間(jian)、加(jia)液的(de)量(liang)及(ji)順(shun)序(xu)進行溫(wen)育操(cao)作(zuo)