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          人(ren)生(sheng)長激素ELISA試(shi)劑(ji)盒分(fen)析說(shuo)明書(shu)

          更新時間(jian):2020-11-10      瀏(liu)覽(lan)次(ci)數(shu):1543

          人(ren)生(sheng)長激素ELISA試(shi)劑(ji)盒分(fen)析說(shuo)明書(shu)

          有(you)效期(qi):6個(ge)月(yue)

          保(bao)存條(tiao)件:2-8℃

           

          樣(yang)本處(chu)理及(ji)要求(qiu)

          1.  血(xue)清:將收集(ji)於血清分(fen)離管(guan)的全(quan)血(xue)標(biao)本在(zai)室(shi)溫(wen)放置(zhi)2小(xiao)時(shi)或4℃過(guo)夜,然(ran)後(hou)1000×g離心(xin)20 分(fen)鐘(zhong),取上清即(ji)可(ke),或將上清置(zhi)於(yu)-20℃-80℃保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)。
          2.  血(xue)漿(jiang):用EDTA或肝素作為抗(kang)凝(ning)劑采集標(biao)本,並(bing)將標(biao)本在(zai)采(cai)集後(hou)的30分(fen)鐘(zhong)內於(yu)2-8℃ 1000×g離心(xin)15分(fen)鐘(zhong),取上清即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce),或將上清置(zhi)於(yu)-20℃-80℃保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)。
          3.  組織(zhi)勻(yun)漿(jiang):用預(yu)冷的(de)PBS (0.01M, pH=7.4)沖(chong)洗(xi)組織(zhi),去(qu)除殘留(liu)血(xue)液(ye)(勻(yun)漿(jiang)中裂(lie)解(jie)的(de)紅細(xi)胞(bao)會影(ying)響測量結果(guo)),稱重(zhong)後(hou)將組織(zhi)剪(jian)碎。將剪碎的組織(zhi)與(yu)對應(ying)體(ti)積(ji)的PBS(壹(yi)般(ban)按(an)1:9的(de)重(zhong)量體積(ji)比,比(bi)如(ru)1g的(de)組織(zhi)樣(yang)品(pin)對應(ying)9mL的(de)PBS,具(ju)體(ti)體(ti)積(ji)可(ke)根據(ju)實(shi)驗需(xu)要適(shi)當調(tiao)整(zheng),並(bing)做(zuo)好記錄(lu)。推薦在PBS中(zhong)加(jia)入(ru)蛋(dan)白(bai)酶抑(yi)制劑(ji))加(jia)入(ru)玻(bo)璃勻漿(jiang)器中(zhong),於(yu)冰(bing)上充(chong)分研(yan)磨。為了(le)進壹(yi)步(bu)裂解(jie)組織(zhi)細(xi)胞(bao),可(ke)以(yi)對勻漿(jiang)液進行超聲破(po)碎,或反復(fu)凍融(rong)。*後(hou)將勻漿(jiang)液於(yu)5000×g離心(xin)5~10分(fen)鐘(zhong),取上清檢(jian)測(ce)。

          4.  細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)物上清或其(qi)它生物標(biao)本:請1000×g離心(xin)20分(fen)鐘(zhong),取上清即(ji)可(ke)檢(jian)測(ce),或將上清置(zhi)於(yu)-20℃或-80℃保(bao)存,但(dan)應(ying)避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)。

          註(zhu):標(biao)本溶(rong)血(xue)會影(ying)響檢(jian)測(ce)結果(guo),因此溶(rong)血(xue)標(biao)本不(bu)宜進行此項檢(jian)測。

           

          需(xu)要而(er)未(wei)提供(gong)的(de)試(shi)劑(ji)和器材

          1. 酶標(biao)儀(450nm

          2. 高(gao)精(jing)度(du)加(jia)樣(yang)器及(ji)槍(qiang)頭:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

          3. 37℃恒(heng)溫(wen)箱

          4. 蒸(zheng)餾水或去離子水(shui)

           

           

          實(shi)驗結果(guo)計(ji)算(suan)

          所(suo)測(ce)標(biao)準品(pin)的OD值為橫(heng)坐標(biao),標(biao)準品(pin)的濃(nong)度值(zhi)為縱坐(zuo)標(biao),在坐(zuo)標(biao)紙上或用相關軟件繪(hui)制(zhi)標(biao)準曲(qu)線,並(bing)得(de)到直線回(hui)歸方程(cheng)將樣(yang)品(pin)的OD值代入方程(cheng),計(ji)算(suan)出(chu)樣(yang)品(pin)的(de)濃(nong)度

          1. 試(shi)劑(ji)盒從(cong)冷藏(zang)環(huan)境(jing)中取出(chu)應(ying)在(zai)室(shi)溫(wen)平衡15-30 分(fen)鐘後(hou)方可(ke)使(shi)用,酶標(biao)包(bao)被(bei)板(ban)開(kai)封後(hou)如未(wei)用(yong)完,板(ban)條(tiao)應(ying)裝(zhuang)入(ru)密(mi)封袋(dai)中(zhong)保(bao)存。

          2. 濃(nong)洗(xi)滌液(ye)可(ke)能會有(you)結晶(jing)析出(chu),稀釋(shi)時(shi)可(ke)在(zai)水(shui)浴中(zhong)加(jia)溫(wen)助(zhu)溶(rong),洗(xi)滌時(shi)不影(ying)響結果(guo)。

          3. 各步加(jia)樣(yang)均(jun)應(ying)使(shi)用加(jia)樣(yang)器,並(bing)經(jing)常校(xiao)對其(qi)準確性(xing),以避(bi)免(mian)試(shi)驗誤差(cha)。壹(yi)次(ci)加(jia)樣(yang)時(shi)間(jian)控制(zhi)在5 分(fen)鐘內,如(ru)標(biao)本數(shu)量多,推薦使(shi)用排(pai)槍(qiang)加(jia)樣(yang)。

          4. 請每(mei)次(ci)測定(ding)的同(tong)時做(zuo)標(biao)準曲(qu)線,做(zuo)復孔。如標(biao)本中(zhong)待測(ce)物質含(han)量過(guo)高(樣(yang)本OD 值(zhi)大於標(biao)準品(pin)孔di壹孔的OD 值(zhi)),請先用樣(yang)品(pin)稀釋(shi)液(ye)稀釋(shi)壹(yi)定倍(bei)數(shu)(n 倍(bei))後(hou)再(zai)測(ce)定(ding),計(ji)算(suan)時請乘以總(zong)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)(×n×5)。

          5. 封板(ban)膜(mo)只(zhi)限壹次(ci)性(xing)使(shi)用,以(yi)避(bi)免(mian)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)。

          6. 底物(wu)請避光保(bao)存。

          7. 嚴(yan)格按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)的操(cao)作進行,試(shi)驗結果(guo)判(pan)定(ding)必須以酶標(biao)儀讀數(shu)為準.

          8. 所(suo)有(you)樣(yang)品(pin),洗(xi)滌液(ye)和各種廢棄物都應(ying)按(an)傳(chuan)染(ran)物處(chu)理。

          9. 本試(shi)劑(ji)不同(tong)批號組分(fen)不(bu)得(de)混用。

          10. 試(shi)劑(ji)盒2-8℃冷藏(zang),保(bao)質(zhi)期6個(ge)月(yue)

           

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