倉(cang)鼠Elisa試劑(ji)盒樣(yang)品(pin)收集(ji)、處(chu)理及保(bao)存(cun)方法(fa)

　　倉(cang)鼠Elisa試劑(ji)盒應用雙抗(kang)體夾心法(fa)測定(ding)標本(ben)中(zhong)倉(cang)鼠瘦(shou)素(su)(LEP)。用純化(hua)的(de)倉(cang)鼠瘦(shou)素(su)(LEP)抗體包被(bei)微(wei)孔板，制成(cheng)固相抗體，往(wang)包被(bei)單(dan)抗(kang)的(de)微(wei)孔中(zhong)依(yi)次(ci)加倉(cang)鼠瘦(shou)素(su)(LEP)，再與(yu) HRP 標記的(de)倉(cang)鼠瘦(shou)素(su)(LEP)抗體結(jie)合，形成(cheng)抗體抗(kang)原-酶(mei)標抗體復(fu)合(he)物，經過(guo)*洗滌後加底物 TMB顯(xian)色。TMB在(zai)HRP酶的(de)催化下轉化成(cheng)藍色，並(bing)在(zai)酸(suan)的(de)作用下轉化成(cheng)終(zhong)的(de)黃色。顏色的(de)深(shen)淺和樣(yang)品(pin)中(zhong)的(de)倉(cang)鼠瘦(shou)素(su)(LEP)呈正相關(guan)。用(yong)酶(mei)標儀在(zai) 450nm 波(bo)長下測定(ding)吸(xi)光(guang)度(du)（OD 值(zhi)），通(tong)過(guo)標準(zhun)曲線(xian)計(ji)算樣(yang)品(pin)中(zhong)倉(cang)鼠瘦(shou)素(su)(LEP)濃(nong)度(du)。

　　倉(cang)鼠Elisa試劑(ji)盒安(an)全(quan)性：

　　1）避免(mian)直(zhi)接(jie)接(jie)觸終(zhong)止(zhi)液(ye)和(he)底物A、B。壹(yi)旦接觸到這(zhe)些液體，請(qing)盡快用水沖(chong)洗(xi)。

　　2）實驗(yan)中(zhong)不(bu)要吃(chi)喝、抽煙(yan)或使(shi)用(yong)化妝(zhuang)品(pin)。

　　3）不要用(yong)嘴(zui)吸(xi)取(qu)試(shi)劑(ji)盒裏(li)的(de)任(ren)何(he)成(cheng)份(fen)。

　　倉(cang)鼠Elisa試劑(ji)盒的(de)組成(cheng)：

　　倉(cang)鼠Elisa試劑(ji)盒樣(yang)品(pin)收集(ji)、處(chu)理及保(bao)存(cun)方法(fa)：

　　1）血清(qing)-----操(cao)作(zuo)過(guo)程中(zhong)避免(mian)任(ren)何(he)細(xi)胞(bao)刺(ci)激(ji)。使(shi)用(yong)不含熱(re)原和(he)內毒素(su)的(de)試管。收集(ji)血液(ye)後(hou)，10×g離心10分鐘(zhong)將血清(qing)和紅(hong)細(xi)胞(bao)迅(xun)速(su)小心地分離。

　　2）血漿(jiang)-----EDTA、檸(ning)檬(meng)酸(suan)鹽(yan)、肝素(su)血漿(jiang)可(ke)用(yong)於檢測。1000×g離心30分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)。

　　3）細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液---1000×g離心10分鐘(zhong)去(qu)除(chu)顆(ke)粒(li)和(he)聚合物(wu)。

　　4）組織(zhi)勻漿(jiang)-----將(jiang)組織(zhi)加入(ru)適量生(sheng)理(li)鹽(yan)水搗碎。1000×g離心10分鐘(zhong)，取(qu)上(shang)清(qing)液

　　5）保(bao)存(cun)------如(ru)果(guo)樣品(pin)不立即(ji)使(shi)用(yong)，應將其分(fen)成(cheng)小部分-70 ℃保(bao)存(cun)，避免(mian)反復冷凍(dong)。盡可能(neng)

　　不(bu)要使(shi)用(yong)溶(rong)血或(huo)高血脂(zhi)血。如(ru)果(guo)血清(qing)中(zhong)大(da)量顆(ke)粒(li)，檢測前先(xian)離心或過(guo)濾。不要在(zai)37℃或更高的(de)溫度(du)加(jia)熱解凍(dong)。應在(zai)室溫下解凍(dong)並(bing)確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)均勻地充分(fen)解凍(dong)。