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產品(pin)分類(lei)技(ji)術文(wen)章(zhang)/ Technical Articles
更(geng)新(xin)時間(jian):2019-08-22
瀏(liu)覽(lan)次數:1246大鼠Apo-B48ELISA試劑盒實(shi)驗(yan)科(ke)研實(shi)驗(yan)規(gui)則(ze):
1、將(jiang)液體(ti)加到(dao)酶標(biao)孔(kong)中時,避(bi)免(mian)槍頭(tou)和(he)孔(kong)內(nei)液體(ti)接觸,可(ke)使(shi)槍頭(tou)上的(de)液滴(di)和(he)孔(kong)壁(bi)接觸,液滴(di)會(hui)自(zi)然(ran)流下(xia)去。
2、液體(ti)全(quan)部加完(wan)後(hou),可(ke)將(jiang)酶(mei)標(biao)板(ban)在(zai)桌(zhuo)子上平行(xing)輕(qing)輕(qing)晃(huang)動30秒(miao),混勻(yun)液體(ti)。也可(ke)以用酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)晃(huang)動功能。
3、溫(wen)浴(yu)時,要用不(bu)幹膠或(huo)膠帶(dai)紙(zhi)封好酶(mei)標(biao)板(ban),防(fang)止(zhi)水(shui)分的(de)蒸(zheng)發(fa)。
4、洗板(ban)時,每(mei)次洗液加入(ru)後(hou),應靜置1分鐘(zhong),使(shi)清(qing)洗更加*。沒(mei)有洗板(ban)機(ji)時,倒(dao)去液體(ti)後(hou),要將酶(mei)標(biao)板(ban)在(zai)報(bao)紙(zhi)或(huo)毛(mao)紙(zhi)上用(yong)力拍(pai)幹(gan)。
5、洗液不(bu)夠(gou)時,可(ke)用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)自(zi)行(xing)配(pei)制(zhi)PH7.4,0.02M的(de)磷(lin)酸(suan)緩(huan)沖液,加入(ru)0.1%的吐(tu)溫(wen)6作為洗液。加入(ru)1/1000的疊(die)氮(dan)鈉後(hou)可(ke)長(chang)期保(bao)存(cun)。
洗板(ban)方(fang)法(fa):
手(shou)工(gong)洗板(ban)方(fang)法(fa):吸去(不(bu)可(ke)觸(chu)及板(ban)壁(bi))或(huo)甩掉(diao)酶(mei)標(biao)板(ban)內(nei)的液體(ti);在實(shi)驗(yan)臺(tai)上鋪(pu)墊幾(ji)層(ceng)吸水(shui)紙(zhi),酶(mei)標(biao)板(ban)朝(chao)下(xia)用力拍(pai)幾(ji)次;將(jiang)推薦的洗滌緩(huan)沖液至少0.3ml註(zhu)入(ru)孔(kong)內(nei),浸(jin)泡(pao)1-2分鐘(zhong)。根(gen)據(ju)需要,重復(fu)此過程數次。
自(zi)動(dong)洗板(ban):如(ru)果(guo)有自(zi)動(dong)洗板(ban)機(ji),應在熟(shu)練使(shi)用(yong)後(hou)再用(yong)到(dao)正(zheng)式實(shi)驗(yan)過(guo)程中。
大鼠Apo-B48ELISA試劑盒實(shi)驗(yan)科(ke)研計(ji)算:
以標(biao)準物的(de)濃度(du)為(wei)橫(heng)坐(zuo)標(biao),OD值(zhi)為(wei)縱坐(zuo)標(biao),
在(zai)坐(zuo)標(biao)紙(zhi)上繪(hui)出標(biao)準曲線(xian),根(gen)據(ju)樣(yang)品(pin)的(de)OD
值(zhi)由(you)標(biao)準曲線(xian)查出(chu)相應的濃(nong)度(du);再乘(cheng)以稀釋
倍數;或(huo)用(yong)標(biao)準物的(de)濃度(du)與OD值(zhi)計(ji)算出標(biao)
準曲線(xian)的(de)直(zhi)線(xian)回(hui)歸方(fang)程式,將(jiang)樣(yang)品(pin)的(de)OD值(zhi)
代(dai)入方(fang)程式,計(ji)算出樣(yang)品(pin)濃(nong)度(du),再(zai)乘(cheng)以稀釋
倍數,即為樣(yang)品(pin)的(de)實(shi)際(ji)濃(nong)度(du)。
大鼠Apo-B48ELISA試劑盒實(shi)驗(yan)科(ke)研樣(yang)本處理及要求(qiu):
1. 血(xue)清:室溫(wen)血(xue)液自(zi)然(ran)凝固10-20分鐘(zhong),離心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清(qing),保存(cun)過程中如(ru)出(chu)現(xian)沈澱,應再次離(li)心。
2. 血(xue)漿(jiang):應根(gen)據(ju)標(biao)本的(de)要求(qiu)選擇(ze)EDTA或(huo)檸(ning)檬(meng)酸(suan)鈉作為抗(kang)凝劑,混合(he)10-20分鐘(zhong)後(hou),離心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清(qing),保存(cun)過程中如(ru)有(you)沈澱形成(cheng),應該再(zai)次離(li)心。
3. 尿液:用(yong)無菌管(guan)收集,離(li)心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清(qing),保存(cun)過程中如(ru)有(you)沈澱形成(cheng),應再次離(li)心。胸腹(fu)水(shui)、腦脊(ji)液參(can)照(zhao)實(shi)行(xing)。
4. 細(xi)胞(bao)培養(yang)上清(qing):檢測(ce)分泌(mi)性的(de)成(cheng)份時,用(yong)無菌管(guan)收集。離(li)心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)。檢測(ce)細(xi)胞(bao)內(nei)的成(cheng)份時,用(yong)PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xi)胞(bao)懸液,細(xi)胞(bao)濃度達到100萬/ml左(zuo)右。通過反復(fu)凍(dong)融(rong),以使(shi)細(xi)胞(bao)破壞(huai)並放(fang)出細(xi)胞(bao)內(nei)成份。離心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)。保存(cun)過程中如(ru)有(you)沈澱形成(cheng),應再次離(li)心。
5. 組織標(biao)本:切割標(biao)本後(hou),稱(cheng)取重(zhong)量(liang)。加入(ru)壹定(ding)量(liang)的(de)PBS,PH7.4。用液氮(dan)迅(xun)速(su)冷(leng)凍(dong)保(bao)存(cun)備(bei)用(yong)。標(biao)本融(rong)化後(hou)仍然(ran)保持(chi)2-8℃的(de)溫(wen)度。加入(ru)壹定(ding)量(liang)的(de)PBS(PH7.4),用手(shou)工(gong)或(huo)勻(yun)漿(jiang)器將(jiang)標(biao)本勻(yun)漿(jiang)充分。離(li)心20分鐘(zhong)左右(2000-3000轉(zhuan)/分)。仔(zai)細(xi)收集上清(qing)。分裝(zhuang)後(hou)壹份待檢測(ce),其(qi)余(yu)冷(leng)凍(dong)備(bei)用(yong)。
6. 標(biao)本采集後(hou)盡早進(jin)行提(ti)取,提取按相關(guan)文(wen)獻(xian)進(jin)行,提(ti)取後(hou)應盡快(kuai)進(jin)行實(shi)驗(yan)。若不能(neng)馬(ma)上進(jin)行試驗(yan),可(ke)將(jiang)標(biao)本放(fang)於(yu)-20℃保存(cun),但應避(bi)免(mian)反(fan)復(fu)凍(dong)融(rong).
7. 不(bu)能(neng)檢測(ce)含NaN3的樣(yang)品(pin),因(yin)NaN3抑(yi)制(zhi)辣(la)根(gen)過(guo)氧化物酶(mei)的(HRP)活(huo)性。
大鼠Apo-B48ELISA試劑盒實(shi)驗(yan)科(ke)研推薦:同類(lei)產(chan)品如(ru)下(xia):

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