兔子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)（PⅢNP）ELISA試(shi)劑盒檢測(ce)說明(ming)

兔子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)(PⅢNP)ELISA試(shi)劑盒檢測(ce)說明(ming)：

中(zhong)文(wen)名(ming)：兔(tu)子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)(PⅢNP)ELISA試(shi)劑盒
別(bie)名(ming)：兔(tu)子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)(PⅢNP)ELISA Kit
供(gong)應(ying)商(shang)：上海(hai)仁(ren)捷
規格(ge)：48t/96t
保(bao)存：2~8℃
有效期(qi)：6個月(yue)
樣本：血清、血漿、細胞(bao)上清液、尿(niao)液、體(ti)液、灌洗(xi)液、腦脊髓、心房(fang)水(shui)、胸房(fang)水(shui)、組織(zhi)等。
特(te)點：敏(min)感(gan)性(xing)高(gao)、特(te)異性(xing)強、重復性(xing)好、試(shi)劑穩(wen)定、易(yi)保存(cun)，操(cao)作(zuo)簡(jian)便。
用途(tu)：用於(yu)測(ce)定血清，血漿及(ji)相關液體(ti)樣(yang)本中(zhong)相關含(han)量(liang)或(huo)活(huo)性(xing)。
種(zhong)屬(shu)：人(ren)、大鼠、小(xiao)鼠、兔(tu)子、豬(zhu)、犬、猴(hou)、馬(ma)、牛(niu)、羊(yang)、雞、鴨、魚(yu)等。
運(yun)輸(shu)方(fang)式(shi)：現貨(huo)供(gong)應(ying)，壹般為快(kuai)遞(di)運(yun)輸(shu)，江(jiang)浙(zhe)滬隔(ge)天到(dao)，外地(di)及(ji)偏遠(yuan)地(di)方(fang)三至(zhi)五(wu)天(tian)時間(jian)到(dao)貨(huo)。
檢(jian)測(ce)原(yuan)理：采(cai)用雙(shuang)抗體(ti)夾心ABC-ELISA法(fa)。

兔子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)(PⅢNP)ELISA試(shi)劑盒標(biao)本要求：
包括血清、血漿、尿(niao)液、胸腹(fu)水(shui)、腦脊液、細胞(bao)培養上清等。
1.血清：
室(shi)溫(wen)血液自(zi)然(ran)凝固10-20分(fen)鐘後(hou)，離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈(chen)澱(dian)形成(cheng)，應再次離(li)心。
2.血漿：
應(ying)根據標(biao)本的要求選擇EDTA、檸檬酸(suan)鈉或(huo)肝素作為抗凝劑，混(hun)合(he)10-20分鐘後(hou)，離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈(chen)澱(dian)形成(cheng)，應再次離(li)心。
3.尿(niao)液：
用無菌管(guan)收集(ji)。離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈(chen)澱(dian)形成(cheng)，應再次離(li)心。胸腹(fu)水(shui)、腦脊液參(can)照(zhao)此實行(xing)。
4.細胞(bao)培養上清：
檢(jian)測(ce)分泌(mi)性(xing)的(de)成(cheng)份(fen)時，用無菌管(guan)收集(ji)。離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。檢(jian)測(ce)細胞(bao)內的成(cheng)份(fen)時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞(bao)懸液，細胞(bao)濃度達到(dao)100萬/ml左(zuo)右。通(tong)過(guo)反復(fu)凍(dong)融(rong)，以(yi)使細胞(bao)破壞並(bing)放(fang)出細胞(bao)內成份(fen)。離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。保(bao)存(cun)過(guo)程(cheng)中(zhong)如有沈(chen)澱(dian)形成(cheng)，應再次離(li)心。
5.組(zu)織標(biao)本：
切割標(biao)本後(hou)，稱(cheng)取(qu)重量。加入壹定量(liang)的PBS，PH7.4。用液氮(dan)迅(xun)速(su)冷凍保存備(bei)用。標(biao)本融(rong)化後(hou)仍(reng)然(ran)保(bao)持(chi)2-8℃的溫(wen)度。加入壹定量(liang)的PBS(PH7.4)，用手工(gong)或(huo)勻漿器(qi)將(jiang)標(biao)本勻漿充分。離(li)心20分(fen)鐘左(zuo)右(2000-3000轉/分)。仔(zai)細收集(ji)上清。分(fen)裝(zhuang)後(hou)壹份(fen)待(dai)檢測(ce)，其余(yu)冷凍備(bei)用。

兔子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)(PⅢNP)ELISA試(shi)劑盒特(te)點：
1、專壹性(xing)強。抗原(yuan)與(yu)抗體(ti)的免疫反應(ying)是(shi)專壹反應(ying)，而(er)免疫酶技術(shu)以(yi)免疫反應(ying)為基(ji)礎，所(suo)檢(jian)測(ce)的對象(xiang)是抗原(yuan)（或(huo)抗體(ti)），使用的抗體(ti)除(chu)標(biao)記(ji)了(le)酶以(yi)外，與(yu)普(pu)通(tong)抗體(ti)的免疫反應(ying)特(te)性(xing)並(bing)無(wu)多(duo)大(da)差別(bie)。
2、靈敏(min)度高。由於(yu)抗體(ti)聯結上了(le)酶，因此，借(jie)助(zhu)於(yu)酶(mei)與(yu)底物(wu)的(de)顯色(se)反應(ying)，顯示抗原(yuan)與(yu)抗體(ti)的結(jie)合(he)，大大提(ti)高(gao)了(le)檢測(ce)的靈敏(min)性(xing)，使(shi)檢(jian)測(ce)水平(ping)接近(jin)放(fang)射免疫測(ce)定法(fa)。
3、樣品(pin)易(yi)保存。經過(guo)酶反應(ying)顯示的有色(se)產物大(da)多(duo)比(bi)較(jiao)穩(wen)定，因此有利(li)於(yu)樣(yang)品(pin)的(de)保存。
4、結果(guo)易觀(guan)察。對檢(jian)測(ce)結果(guo)即(ji)可用肉眼(yan)觀察，又(you)可(ke)用顯微鏡觀(guan)察，也(ye)可(ke)以(yi)用分光光(guang)度計進行(xing)比(bi)色(se)測(ce)定，還(hai)可用顯微鏡觀(guan)察。這(zhe)是(shi)因為某些酶(mei)反應(ying)產物能(neng)使(shi)電(dian)子密(mi)度發生改變，從而(er)引起(qi)被檢(jian)測(ce)物的(de)顯示。
5、可以(yi)定量(liang)測(ce)定。溶液中(zhong)的抗原(yuan)物質(zhi)，應(ying)用酶免吸附(fu)技術(shu)進行(xing)比(bi)色(se)測(ce)定，依(yi)據光(guang)密(mi)度值的變(bian)化，可以(yi)定量(liang)。預計用細胞(bao)分光(guang)光(guang)度計可對組(zu)織內的抗原(yuan)進行(xing)免疫酶技術(shu)的定量(liang)測(ce)定。
6、可(ke)以(yi)大規(gui)模(mo)測(ce)定樣(yang)品(pin)。如(ru)有成千(qian)上萬份(fen)樣品(pin)需(xu)要進行(xing)檢(jian)測(ce)，免疫酶技術(shu)都能(neng)在(zai)較(jiao)短(duan)時間(jian)內完成(cheng)。
7、.儀(yi)器和(he)試(shi)劑簡(jian)單。對免疫沒技術(shu)來(lai)說(shuo)，不(bu)需(xu)要熒光顯微鏡，也(ye)不(bu)需(xu)要(yao)測(ce)定放(fang)射性(xing)的(de)特(te)殊(shu)儀(yi)器，所(suo)用儀(yi)器及(ji)試(shi)劑均屬(shu)壹般性(xing)儀(yi)器與(yu)試(shi)劑，普(pu)通(tong)實(shi)驗(yan)室(shi)及(ji)生產應用單位(wei)均易購(gou)置(zhi)。

兔(tu)子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)(PⅢNP)ELISA試(shi)劑盒操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)：
1、使(shi)用前，將(jiang)所(suo)有試(shi)劑充分混(hun)勻。不(bu)要使液體(ti)產生大量的泡(pao)沫(mo)，以(yi)免加樣(yang)時加入大量(liang)的氣(qi)泡(pao)，產生加樣(yang)上的(de)誤差。
2、根據待(dai)測(ce)樣品(pin)數(shu)量加上標(biao)準品(pin)的(de)數量決定所(suo)需(xu)的(de)板(ban)條數(shu)。每(mei)個標(biao)準品(pin)和(he)空白孔(kong)建議做(zuo)復孔(kong)。每(mei)個樣品(pin)根據自(zi)己(ji)的(de)數(shu)量(liang)來(lai)定，能(neng)使(shi)用復孔(kong)的盡量(liang)做(zuo)復孔(kong)。
3、加入稀釋(shi)好後(hou)的(de)標(biao)準品(pin)50ul於(yu)反應(ying)孔(kong)、加入待(dai)測(ce)樣品(pin)50ul於(yu)反應(ying)孔(kong)內。立即(ji)加入50ul的生物素標(biao)記(ji)的抗體(ti)。蓋上膜(mo)板(ban)，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫(wen)育(yu)1小時。
4、甩去(qu)孔(kong)內液體(ti)，每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液，振(zhen)蕩(dang)30秒，甩(shuai)去洗(xi)滌(di)液，用吸水紙(zhi)拍幹(gan)。重復此操(cao)作(zuo)3次(ci)。如(ru)果(guo)用洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次數增(zeng)加壹次。
5、每(mei)孔(kong)加入80ul的親(qin)和(he)鏈酶素-HRP，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫(wen)育(yu)30分鐘。
6、甩(shuai)去(qu)孔(kong)內液體(ti)，每(mei)孔(kong)加滿洗(xi)滌(di)液，振(zhen)蕩(dang)30秒，甩(shuai)去洗(xi)滌(di)液，用吸水紙(zhi)拍幹(gan)。重復此操(cao)作(zuo)3次(ci)。如(ru)果(guo)用洗(xi)板(ban)機洗(xi)滌(di)，洗(xi)滌(di)次數增(zeng)加壹次。
7、每(mei)孔(kong)加入底物(wu)A、B各(ge)50ul，輕輕振蕩(dang)混(hun)勻，37℃溫(wen)育(yu)10分鐘。避免光照。
8、取出酶(mei)標(biao)板(ban)，迅速(su)加入50ul終止液，加入終止液後(hou)應(ying)立即(ji)測(ce)定結(jie)果(guo)。
9、在450nm波(bo)長(chang)處(chu)測(ce)定各(ge)孔(kong)的OD值(zhi)。

標(biao)簽：兔子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)(PⅢNP)ELISA試(shi)劑盒，兔子Ⅲ型(xing)前(qian)膠(jiao)原(yuan)肽(tai)(PⅢNP)ELISA Kit，兔子ELISA試(shi)劑盒