昆蟲多(duo)巴脫(tuo)羧(suo)酶（DOPA）ELISA試劑(ji)盒(he)廠(chang)家(jia)價(jia)格及服(fu)務(wu)

昆蟲多(duo)巴脫(tuo)羧(suo)酶（DOPA)ELISA試劑(ji)盒(he)廠(chang)家(jia)價(jia)格及服(fu)務(wu)驗原(yuan)理

試劑(ji)盒(he)采用雙(shuang)抗(kang)體(ti)壹(yi)步夾心法酶聯免疫(yi)吸附(fu)試驗(yan)（ELISA）。往預(yu)先(xian)包被昆蟲多(duo)巴脫(tuo)羧(suo)酶（DOPA）捕(bu)獲抗(kang)體(ti)的(de)包被微孔中(zhong)，依(yi)次加(jia)入(ru)標(biao)本(ben)、標(biao)準品、HRP標(biao)記(ji)的(de)檢測(ce)抗(kang)體(ti)，經過(guo)溫育並*洗(xi)滌(di)。用底(di)物(wu)TMB顯(xian)色(se)，TMB在過(guo)氧化(hua)物酶的(de)催化(hua)下(xia)轉化(hua)成(cheng)藍(lan)色(se)，並在酸(suan)的(de)作用下(xia)轉化(hua)成(cheng)zui終(zhong)的(de)黃色(se)。顏(yan)色(se)的(de)深淺(qian)和樣品中(zhong)的(de)昆蟲多(duo)巴脫(tuo)羧(suo)酶（DOPA）呈正相關。用酶標(biao)儀(yi)在450nm 波長下(xia)測(ce)定吸(xi)光度(du)（OD 值），計算(suan)樣品濃(nong)度(du)。

需(xu)要而未(wei)提供(gong)的(de)試劑(ji)和器材(cai)

• 酶標(biao)儀(yi)（450nm）
• 高精(jing)度(du)加(jia)樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
• 37℃恒溫箱(xiang)
• 蒸餾水或去(qu)離子(zi)水

試劑(ji)盒(he)組(zu)成(cheng)

備(bei)註(zhu)：

1.  標(biao)準品濃(nong)度(du)依次為：80、40、20、10、5、2.5 U/L

2.  經過(guo)大(da)量(liang)正常(chang)標(biao)本(ben)檢(jian)驗(yan)，標(biao)本(ben)的(de)正常(chang)濃度(du)值均(jun)在試劑(ji)盒(he)提供(gong)的(de)檢測(ce)範圍內，實驗(yan)過(guo)程中(zhong)直接取(qu)50μL樣本上(shang)樣即可(ke)。當(dang)有(you)部分樣本值超過(guo)zui大(da)標(biao)準品濃(nong)度(du)時，可(ke)用樣本稀釋(shi)液(ye)將(jiang)標(biao)本(ben)進(jin)行(xing)適當(dang)稀(xi)釋(shi)後(hou)再(zai)進(jin)行(xing)實驗(yan)。

註(zhu)意(yi)事項(xiang)

• 嚴格按(an)照(zhao)規(gui)定的(de)時間(jian)和溫度(du)進行(xing)溫育以(yi)保(bao)證準確結(jie)果(guo)。所(suo)有試劑(ji)都(dou)必(bi)須在使用前(qian)達到室溫20-25℃。使(shi)用後(hou)立即(ji)冷藏保(bao)存試劑(ji)。
• 洗(xi)板不正確可(ke)以導致(zhi)不準確的(de)結(jie)果(guo)。在加(jia)入(ru)底(di)物(wu)前(qian)確保(bao)盡量(liang)吸幹(gan)孔內液體(ti)。溫育過(guo)程中(zhong)不要(yao)讓微孔幹(gan)燥(zao)掉(diao)。
• 消除板(ban)底(di)殘(can)留(liu)的(de)液體(ti)和手(shou)指印，否(fou)則影響(xiang)OD值。
• 底(di)物(wu)顯(xian)色(se)液(ye)應(ying)呈無色或很淺(qian)的(de)顏色(se)，已(yi)經變藍(lan)的(de)底(di)物(wu)液不能使(shi)用。
• 避(bi)免試(shi)劑(ji)和標(biao)本(ben)的(de)交叉(cha)汙(wu)染以(yi)免造(zao)成(cheng)錯誤結(jie)果(guo)。
• 在儲存和溫育時(shi)避(bi)免強(qiang)光直接照(zhao)射。
• 平(ping)衡至(zhi)室溫後(hou)再(zai)打(da)開密(mi)封袋(dai)以(yi)防水(shui)滴凝(ning)聚(ju)在冷板條上(shang)。
• 任何反應(ying)試(shi)劑(ji)不能接觸漂(piao)白(bai)溶(rong)劑(ji)或漂(piao)白(bai)溶(rong)劑(ji)所(suo)散發(fa)的(de)強(qiang)烈(lie)氣體(ti)。任(ren)何漂(piao)白(bai)成(cheng)分都會破(po)壞(huai)試劑(ji)盒(he)中(zhong)反應(ying)試(shi)劑(ji)的(de)生(sheng)物活(huo)性(xing)。
• 不能使(shi)用過(guo)期(qi)產品。
• 如(ru)果(guo)可(ke)能傳(chuan)播(bo)疾病，所有(you)的(de)樣品都(dou)應(ying)管(guan)理好(hao)，按(an)照(zhao)規(gui)定的(de)程序(xu)處理樣品和檢測(ce)裝(zhuang)置。

試劑(ji)準備(bei)

試劑(ji)盒(he)從(cong)冷藏環(huan)境中取(qu)出應(ying)在室溫平(ping)衡後(hou)方(fang)可(ke)使用。

20×洗(xi)滌(di)緩沖液(ye)的(de)稀釋(shi)：蒸(zheng)餾水按(an)1：20稀釋(shi)，即(ji)1份20×洗(xi)滌(di)緩沖液(ye)加(jia)19份(fen)蒸餾水。

操作步驟

1.   從室溫平(ping)衡20min後(hou)的(de)鋁箔袋(dai)中(zhong)取出所(suo)需(xu)板條，剩(sheng)余(yu)板(ban)條用自(zi)封袋(dai)密(mi)封放回(hui)4℃。
2.   設置標(biao)準品孔和樣本孔，標(biao)準品孔各(ge)加(jia)不同(tong)濃(nong)度(du)的(de)標(biao)準品50μL；
3.   樣本孔中加(jia)入待(dai)測(ce)樣本50μL；空白孔不加(jia)。
4.   除空(kong)白(bai)孔外(wai)，標(biao)準品孔和樣本孔中(zhong)每(mei)孔加(jia)入(ru)辣根(gen)過(guo)氧化(hua)物酶（HRP）標(biao)記(ji)的(de)檢測(ce)抗(kang)體(ti)100μL，用封(feng)板膜(mo)封(feng)住反應(ying)孔，37℃水(shui)浴(yu)鍋或恒溫箱(xiang)溫育60min。
5.   棄去(qu)液體(ti)，吸水紙上(shang)拍(pai)幹，每孔加(jia)滿(man)洗(xi)滌(di)液(ye)（350μL），靜置1min，甩去(qu)洗(xi)滌(di)液(ye)，吸(xi)水(shui)紙(zhi)上(shang)拍(pai)幹，如此(ci)重復洗(xi)板5次（也(ye)可(ke)用洗(xi)板機(ji)洗(xi)板）。
6.   每(mei)孔加(jia)入(ru)底(di)物(wu)A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.   每(mei)孔加(jia)入(ru)終(zhong)止液50μL，15min內，在450nm波長處測(ce)定各(ge)孔的(de)OD值。

實驗結(jie)果(guo)計算(suan)

以所測(ce)標(biao)準品的(de)OD值為橫坐(zuo)標(biao)，標(biao)準品的(de)濃度(du)值為縱坐(zuo)標(biao)，在坐標(biao)紙(zhi)上(shang)或用相(xiang)關軟(ruan)件繪制標(biao)準曲線，並得到(dao)直(zhi)線回歸方(fang)程，將(jiang)樣品的(de)OD值代(dai)入方(fang)程，計算(suan)出樣品的(de)濃度(du)。

試劑(ji)盒(he)性(xing)能

•  檢測(ce)範圍：2.5 U/L – 80 U/L。
•  靈敏度(du)：zui低檢測(ce)濃度(du)小於(yu)0.1 U/L。
•  特異(yi)性(xing)：不與其(qi)它(ta)可(ke)溶(rong)性(xing)結(jie)構(gou)類似(si)物(wu)交叉(cha)反應(ying)。
•  重復性(xing)：板內變異(yi)系(xi)數小於(yu)10% ，板間變異(yi)系(xi)數小於(yu)15% 。

?

l 本試劑(ji)盒(he)用於(yu)體外(wai)定量(liang)檢測(ce)體液、腔(qiang)液、組(zu)織勻(yun)漿(jiang)及相(xiang)關液(ye)體(ti)樣本中昆蟲多(duo)巴脫(tuo)羧(suo)酶（DOPA）的(de)活性(xing)。

l 有效期(qi)：6個月

l 保(bao)存條件：2-8℃

• 昆蟲多(duo)巴脫(tuo)羧(suo)酶（DOPA)ELISA試劑(ji)盒(he)廠(chang)家(jia)價(jia)格及服(fu)務(wu)
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